Грунтовка откосов: Штукатурка, шпаклевка, грунтовка и покраска откосов

«Какая грунтовка, штукатурка, шпаклевка лучше подходит для наружных откосов окон?» — Яндекс Кью

Окна Мастер

Популярное

Сообщества

Data scienceСтроительные материалы+2

Александр Федорук

2 сентября 2021  ·

500

ОтветитьУточнить

Окна мастер

10

Производим и устанавливаем пластиковые окна в Москве и МО  · 11 нояб 2021  · oknamaster.ru

Отвечает

Алексей Калитин

Откосы постоянно подвергаются внешним воздействиям. Это и солнечные лучи, и повышенная влажность, загрязнения, осадки, перепады температур. Поэтому при выборе смесей стоит ориентироваться на эти факторы.

Грунтовку обычно используют после очистки откоса от мусора и старой отделки. Лучше всего ее наносить перед штукатуркой. Она укрепляет основу, улучшает адгезию и защищает от влаги.

Для наружных работ лучше всего выбирать морозостойкую и водостойкую штукатурку.

Хорошо себя зарекомендовали:

• кнауф;
• ceresit;
• stabill;
• weber-vetonit.

Шпаклевки бывают двух видов: сухие смеси и готовые. Также они отличаются по основному компоненту. Это может быть цемент, гипс, полимеры и т.д.

И здесь при выборе стоит ориентироваться на устойчивость к сырости, сотрясениям и вибрациям, невосприимчивость к грибку и плесени, а ещё на срок эксплуатации. Эту информацию можно увидеть на упаковке или узнать у продавца-консультанта.

Качественные растворы обычно стоят довольно дорого, но к ним предъявляют высокие требования. Если вы правильно подберете материалы, то результат будет радовать вас долгие годы.

Больше полезной информации у нас в блоге

Перейти на oknamaster.ru/info

Комментировать ответ…Комментировать…

Поль Геннадьевич Курилкин

3

Профессионально занимаюсь механизированными малярными работами в интерьерах и на пром…  · 24 сент 2021

Нужно понимать, что штукатурка — выравнивающий материал, который работает в слое от 5мм, а шпатлёвка до 5мм. Если же мы говорим про фасады, то понимаем здесь только цементным составы как шпатлевки, так и штукатурки, а значит иолщина слоя цементной штукатурке работает от 10мм, а шпатлевка от 1 до 4 мм. Одна из лучших шпатлевочных смесей на цементной основе — vetonit VH… Читать далее

Комментировать ответ…Комментировать…

РЕМОНТ КВАРТИР МОСКВА и СПБ

Ремонт квартир под ключ в Москве и Санкт-Петербурге  · 27 сент 2021

Антонина, добрый день.

В продуктовой линейке Кнауф, имеется штукатурка и шпаклёвка для любого типа работ, в том числе наружных. Лично мы, доверяем этому бренду, за 18 лет работы нареканий не было.

Комментировать ответ…Комментировать…

Вы знаете ответ на этот вопрос?

Поделитесь своим опытом и знаниями

Войти и ответить на вопрос

Установить откосы в Москве — цены и отзывы на мастеров

Подготовка, этапы, стандарты, гарантии — отвечаем на самые популярные вопросы о нашей работе

Узнать

Как работает сервис

25 отзывов от 392 клиентов в Москве — 4.7/5 средняя оценка.

Установка откосов

Полная смета

«Очень понравился молодой человек, сделал все очень хорошо и очень достойно вел себя. Буду рекомендовать мастера. Мы остались довольны, и сайт ваш нашли и очень приятный человек. А самое приятное, что прежде чем купить материал, он нам рассказал, что цена работы зависит от материала, если бы не прояснил, мы были бы раздражены. Можно делать из гипсокартона или пластиковые. А на сайте одна цена и нет ничего про материалы. Для нас, людей пенсионного возраста, цена имеет значение. Молодец он!»

12 марта 2020, Москва, Улица Академика Янгеля

Укладка плитки на стену

Полная смета

«Адекватная, исполнительная, мне приходилось ее постоянно спрашивать по материалу, она всегда на связи, всегда отвечала, очень помогла»

5 октября 2022, Москва, Кузьминки

Установка откосов

«Всё нормально. Просто снижаю оценку, так как не знаю как будет все держаться в дальнейшем. На данный момент все хорошо. Мастер опытный, хороший специалист.»

16 мая 2022, Москва, Марксистская

Установка откосов

«Рекомендую конечно. Мастер толковый. Все рассказал. Все показал.»

31 марта 2023, Бауманская

Установка откосов

Полная смета

«Всё хорошо, мы довольны. Мастер приехал вовремя и перед приездом предупредил. Несколько заказов было ранее, администратор принимал мои пожелания, а мастера связывались не те. Они такие работы не выполняли. Связь между мастером и администратором не налажена.»

4 марта 2021, Селигерская

Установка откосов

Полная смета

«Борис был очень вежлив и приветлив. Все сделал отлично!»

1 декабря 2022, Бауманская

Установка откосов

Полная смета

«Мастер не доклеил уголки на окнах. Не совсем качественно заделал герметиком дырку между окном и плинтусом. В остальном, все было нормально. Оценка 8 из 10.»

25 октября 2021, Мытищи

Установка откосов

Полная смета

«Большое спасибо Андрею! Очень быстро и аккуратно выполнил работу, проконсультировал по всем вопросам)»

19 апреля 2022, Ясенево

Установка откосов

Полная смета

«Мастер молодец. Наконец нашел хорошего мастера. До этого приходило 3е мастеров и не смогли ничего сделать. Этот мастер просто взял инструменты и сделал. »

4 октября 2021, Шелепиха

Герметизация окон

Полная смета

«Хороший мастер, всем довольна: начиная с консультации, закупкой материалов и самой выполненной работой.»

9 декабря 2021, Улица народного ополчения

Удобный контроль заказа

Как рассчитать эффективность праймеров для ПЦР

Зачем беспокоиться об эффективности праймеров для ПЦР?

Каждый раз, когда вы получаете новый набор праймеров, особенно при использовании химии SYBR Green во время количественной полимеразной цепной реакции (кПЦР), вы всегда должны проводить стандартную кривую для расчета эффективности ваших праймеров для ПЦР.

Причина, по которой мы беспокоимся о расчете эффективности праймеров для ПЦР, заключается в том, чтобы правильно анализировать результаты. Для расчета экспрессии гена, такого как метод дельта-дельта Ct, предполагается, что эффективность праймеров ПЦР сопоставима для интересующего гена и гена домашнего хозяйства. Таким образом, разная эффективность праймеров для ПЦР в вашем эксперименте может повлиять на конечный результат.

Освоение КПЦР

Видеоруководство по расчету эффективности праймеров КПЦР можно найти в нашем курсе «Освоение КПЦР».
>>Используйте код 20QPCR , чтобы получить скидку 20% <<

Каково правильное значение эффективности праймера для ПЦР?

Очевидно, что идеальный комплект грунтовки будет иметь эффективность 100%. Другими словами, для каждого цикла ПЦР количество копий продукта ПЦР удваивается в течение логарифмической фазы реакции ПЦР.

Получение 100% эффективности всех ваших наборов праймеров маловероятно. Поэтому рекомендуется, чтобы все наборы праймеров, использованные в вашем эксперименте, имели эффективность от до 90–110% . В таком случае они считаются сопоставимыми.

Как выполнить стандартную кривую

Итак, вы разработали и получили новые грунтовки. Что теперь? Что ж, первое, что вам понадобится, это шаблон для создания стандартной кривой. В идеале это должно быть из того же источника, который будет использоваться во время вашего эксперимента. Итак, если вы создали комплементарную ДНК (кДНК) из РНК, извлеченной, например, из эксперимента с клеточной культурой, используйте один из этих образцов в качестве шаблона.

Для построения стандартной кривой рекомендуется начать с неразбавленного образца кДНК в качестве первой точки. Исходя из этого, вам нужно создать серию серийных разведений. Разведение 1:10 обычно используется для создания стандартной кривой по крайней мере с 5 точками. Если вы можете включить больше точек в свою стандартную кривую, то это будет лучше. Пока стандартная кривая охватывает значения Ct ваших экспериментальных образцов, все в порядке.

Вот пример стандартной кривой серийных разведений 1:10, содержащей 5 точек:

Выполните реакцию количественной ПЦР, используя в качестве отправной точки стандартную кривую, содержащую рекомендуемые реагенты и концентрации для мастер-микса для количественной ПЦР. Обязательно выполняйте каждый образец как минимум в двух экземплярах, а еще лучше — в трех экземплярах. Кроме того, не забудьте положить на чашку без контрольных образцов (NTC), т. е. воду для ПЦР вместо образца, чтобы выявить любое загрязнение.

Как рассчитать эффективность праймеров

Некоторые машины для количественной ПЦР могут рассчитать это для вас, но я предпочитаю экспортировать необработанные результаты и вычислять эффективность праймеров ПЦР вручную.

Вот как рассчитать эффективность праймера с помощью Microsoft Excel. Формула Excel, используемая в каждом разделе, выделена серым цветом.

1. Рассчитайте средние значения Ct для каждой из ваших повторных/трехкратных повторений

Первым шагом является усреднение значений Ct технических повторов.

Функция в Excel представлена ​​ниже, где значения Ct1 и Ct2 представляют ячейки для каждой технической реплики.

 =СРЕДНЕЕ(Ct1,Ct2) 

2. Рассчитайте логарифм каждого разбавления пробы

Начальное количество зависит от ваших разведений. Так, например, мне нравится называть первое значение « 1 », так как это исходная неразбавленная кДНК. Затем сделайте разведение 1:10 этого значения.

Затем следует определить их логарифмическое значение. Для этого просто используйте функцию LOG в Excel.

 =LOG(Начальное количество) 

3. Получите наклон регрессии между значениями журнала и средними значениями Ct

Чтобы быстро вычислить наклон линии, используйте функцию НАКЛОН в Excel. В частности, это наклон между только что созданными значениями журнала и средними значениями Ct.

 =НАКЛОН(диапазон средних значений Ct, диапазон количества журналов) 

В качестве альтернативы можно построить график значений журнала относительно средних значений Ct в виде графика рассеяния. Для этого сначала создайте график рассеяния между средними значениями Ct и значениями журнала. Затем выберите « Добавить элемент диаграммы» > «Линия тренда» > «Дополнительные параметры линии тренда… ». Отсюда выберите параметр « Display Equation on chart », чтобы просмотреть уравнение регрессии. Значение наклона будет значением в начале (непосредственно перед x). В этом примере наклон равен 9.(-1/Значение наклона)-1)*100

Это даст вам показатель эффективности праймера в процентах. Надеюсь, это между 90 – 110% . При использовании вышеуказанного набора данных эффективность достигает 98%.

Если стандартная кривая и эффективность праймера не находятся в желаемом диапазоне, не беспокойтесь. Есть несколько вещей, которые вы можете сделать, чтобы повысить эффективность ваших праймеров для ПЦР, например, отрегулировать концентрацию праймеров и температуру отжига вашей реакции. Если после этого вы действительно боретесь с трудностями, я предлагаю разработать новые праймеры.

Калькулятор эффективности праймеров для ПЦР

Если хотите, я создал онлайн-калькулятор эффективности праймеров для ПЦР. Чтобы использовать это, просто введите наклон линии, как определено выше, и калькулятор вернет значение эффективности праймера и коэффициент усиления (E).

Бесплатный шаблон Microsoft Excel для определения эффективности праймера для ПЦР

Вы все еще пытаетесь рассчитать эффективность праймера для ПЦР? Что ж, я сделал рабочий лист Excel, чтобы, надеюсь, помочь вам.

Все, что вам нужно сделать, это ввести значения Ct из ваших повторов и коэффициент разбавления, используемый при построении стандартной кривой, т.е. 10, а лист (надеюсь) сделает все остальное за вас. Это также позволит определить наклон, значение R ² и значение эффективности праймера для ПЦР в процентах.

Щелкните здесь, чтобы загрузить шаблон.

Низкая эффективность ПЦР | Thermo Fisher Scientific

Эффективность любой ПЦР можно оценить, проведя эксперимент с серией разведений с использованием целевого анализа. Мы рекомендуем серию 10-кратных разведений. После правильной настройки базовой линии и порога наклон стандартной кривой можно перевести в значение эффективности:

Наклон стандартной кривой указывает на эффективность ПЦР. Программы Applied Biosystems™ StepOne™, StepOnePlus™ и 7500 Real-Time PCR System версии 2.0 рассчитывают эффективность ПЦР, если построена стандартная кривая.
 
Эффективность ПЦР должна быть в пределах 90–100% (-3,6 ≥ наклон ≥ -3,3). Если эффективность составляет 100%, значения CT 10-кратного разведения будут отличаться друг от друга на 3,3 цикла (на каждое изменение CT приходится 2-кратное изменение). Если наклон ниже –3,6, то ПЦР имеет низкую эффективность.

Параметры, влияющие на эффективность ПЦР

Несколько параметров могут влиять на эффективность ПЦР (ранжированы от наиболее часто встречающихся к наименее частым, на основании наших наблюдений в Applied Biosystems Support):

• Ваши образцы могут содержать ингибиторы ПЦР
• Возможно, конструкция вашего праймера и/или зонда для ПЦР неоптимальна
• Неточное пипетирование образцов и реагентов
• Стандартная кривая могла быть проанализирована неправильно

Ваши образцы могут содержать ингибиторы ПЦР

РНК, содержащая ингибирующие соединения (например, реагенты для подготовки образцов, избыточный белок), может привести к частичному или полному ингибированию последующей ПЦР. Ингибиторы ПЦР, происходящие из исходного материала, включают гепарин (>

0,15 мг/мл), белки, такие как гемоглобин (> 1 мг/мл), полисахариды, хлорофиллы, меланин, гуминовые кислоты и т. д. Загрязняющие вещества на этапе экстракции нуклеиновых кислот включают SDS (> 0,01% мас./об.), фенол (>0,2% мас./об.), этанол (>1%), протеиназа К, гуанидиний и ацетат натрия (>5 мМ).

Как определить ингибирование ПЦР

Анализ образцов РНК с помощью УФ-спектрофотометра, биоанализатора или спектрофотометра Thermo Scientific™ NanoDrop™ для оценки количества и качества. Образец РНК высокого качества должен иметь показание УФ-спектрофотометра A260/A280, близкое к 2. Было замечено, что показание A260/A280, равное 1,8, предполагает наличие в образцах около 70–80% белка; существует много белков, которые ингибируют как ПЦР, так и обратную транскрипцию.

График ингибирования: можно использовать данные ПЦР в реальном времени из графиков стандартной кривой, чтобы определить, происходит ли ингибирование на уровне, вызывающем ложные результаты.

При использовании для характеристики ингибирования эти полулогарифмические стандартные кривые называются графиками ингибирования. См. раздел «Подготовка РНК и обратная транскрипция» Руководства по проведению относительного количественного анализа экспрессии генов с использованием количественной ПЦР в реальном времени.

Раствор

• Выполните процесс очистки РНК на образце, используя новый метод очистки. Выберите набор для выделения РНК в зависимости от типа образца. См. дерево решений для набора для выделения РНК, чтобы сделать правильный выбор реагента/набора.
• Дальнейшая очистка образцов: РНК со значительно более низким соотношением A260/A280 следует дополнительно очистить путем экстракции фенолом и хлороформом, осаждения LiCl или промывки для удаления остаточной соли.
• Протестируйте образец при более низкой концентрации матрицы, при которой известно, что ингибирование ПЦР не влияет на результаты ПЦР в реальном времени.

Ваш дизайн праймера и/или зонда для ПЦР может быть не оптимальным.

Оптимальный дизайн праймеров и зондов для ПЦР является обязательным условием для эффективной ПЦР.

Индивидуальный дизайн Applied Biosystems™ TaqMan® Gene Expression Assay основан на шаблонной последовательности, предоставленной заказчиком. Вы также можете разработать свои собственные анализы с помощью других программ и отправить нам последовательности олигонуклеотидов для синтеза. Вы должны выполнить биоинформационную оценку последовательностей перед отправкой, чтобы избежать сбоя ПЦР.

Прочтите биоинформационную оценку последовательности для пользовательских анализов экспрессии генов TaqMan, чтобы понять, как проводить биоинформационную оценку последовательности матрицы.

Биоинформационная оценка позволяет выполнить три задачи:

1. Идентифицировать уникальную последовательность с помощью BLAST (базовый инструмент поиска локального выравнивания). Если представленная последовательность уникальна (или из негомологичной области), анализ, разработанный на этой матрице, выявляет только интересующий транскрипт.
2. Маскируйте области низкой сложности с помощью RepeatMasker. Области низкой сложности, такие как последовательности ALU, обычно находятся в последовательностях геномной ДНК. Если вы разработаете свой анализ для этих областей, праймеры или зонд будут быстро исчерпаны, если в образцах есть какая-либо геномная ДНК.
3. Замаскируйте сайты SNP в последовательности, чтобы праймеры и зонды не создавались на сайтах SNP.

Неточное пипетирование образцов и реагентов

Точное пипетирование с помощью регулярно калибруемых пипеток имеет решающее значение для получения точных и точных данных. Пипетирование малых объемов (т. е. <5 мкл) может привести к неточности, и пипетирование объемов меньше этого не рекомендуется, если только пипетки не предназначены для этих малых объемов и регулярно не калибруются. Также рекомендуется ненадолго отжать запечатанные планшеты перед запуском на приборе, используя низкоскоростное центрифугирование. В таблице ниже перечислены некоторые последствия неправильного пипетирования.

Consequences of inaccurate pipetting

Pipetting problem	Consequence
Sample: Poor pipetting of identical replicates	High C T standard deviations
Standards: Poor pipetting of standards	High C T стандартные отклонения (идентичные повторы), значение R2 <0,99
Стандарты: Постоянное пипетирование избыточного разбавителя при серийном разведении (например, 100 мкл вместо 90 мкл)	Потенциально хороший R 2 значение ≥0,99; однако наклон стандартной кривой будет неточным; ощущается более низкая эффективность ПЦР анализа
Стандарты: постоянное пипетирование недостаточного разбавителя при серийном разведении (например, 80 мкл вместо 90 мкл)	Потенциально хорошее значение R2 ≥0,99; однако наклон стандартной кривой будет неточным; ощущается более высокая эффективность ПЦР анализа
Стандарты: последовательное пипетирование избыточного стандартного образца в серийном разведении (например, 12 мкл вместо 10 мкл)	Потенциально хорошее значение R2 ≥0,99; однако наклон стандартной кривой будет неточным; ощущается более высокая эффективность ПЦР анализа
Стандарты: последовательное пипетирование недостаточного стандартного образца в серийном разведении (например, 8 мкл вместо 10 мкл)	Потенциально хорошее значение R2 ≥0,99; однако наклон стандартной кривой будет неточным; предполагаемая более низкая эффективность ПЦР анализа

Стандартная кривая, возможно, не была должным образом проанализирована

Раствор

После проведения ПЦР необходимо проанализировать продукты ПЦР. Для проведения анализа рекомендуется использовать функцию Auto C _T .

Проверьте, является ли NTC отрицательным или незначительным.

Необходимо проверить совмещение экспериментальных точек на стандартной кривой. Повторности должны быть хорошего качества (значения C

T должны быть максимально близкими, в пределах 0,3 C _T ). Используйте значение R ² для оценки качества результатов — значение 0,99 и выше указывает на хорошую точность. Значение наклона должно быть как можно ближе к –3,32.

Убедитесь, что базовый уровень установлен правильно. Используйте функции Auto C _T или Auto Baseline.

Проверить отсутствие выбросов.

Низкий C _T Выбросы:

Если точка, представляющая наиболее концентрированный образец стандартной кривой, находится позже C _T выше ожидаемого, но остальная часть кривой соответствует ожидаемой, вполне вероятно, что эта точка разбавления показывает ингибирование (см. рисунок ниже). Опусти точку и проанализируй заново. Обычно это приводит к тому, что кажется сверхэффективным PCR (наклон больше -3,3, например -2,9).

 

Разведения (1:10) мишени, экзон 4, амплифицированные в двух повторностях. ΔC _T между двумя наиболее концентрированными образцами составляет всего 2,8, что указывает на присутствие в образце ингибиторов ПЦР. Дальнейшее разбавление увеличивает ΔC _T между последовательными разведениями до 3,3.

Высокие выбросы CT:

Высокие выбросы C _T обычно являются результатом очень небольшого числа копий, изначально присутствующих в реакции. Обычно они наблюдаются при значениях C _T выше 35 циклов и могут увеличивать или уменьшать наклон. Эти стохастические вариации присущи распределению Пуассона, однородности смеси и/или технике пипетирования и могут составлять предел обнаружения. Некоторые люди считают, что предел количественного определения достигается, когда стандартное отклонение стандарта составляет ≥ 0,5.