Антигрибковая грунтовка для стен: составы от плесени и грибка на стенах, противогрибковая грунтовка по бетону, антиплесень для ванной комнаты — ЖК Акваполис

Содержание

проникающие противогрибковые составы, расход на 1 м2, грунтовки «Оптимист» и «Старатели»

Грунтование поверхности является необходимым этапом при проведении отделочных работ. Грунтовочные смеси улучшают адгезию, в определенных случаях сокращают расход отделочного материала. На рынке строительных материалов существует масса разновидностей таких растворов. Рассмотрим подробно, что представляет собой грунтовка глубокого проникновения, для чего она необходима.

Что это такое?

Грунт глубокого проникновения предназначен для обработки пористых поверхностей. При нанесении смесь проникает в структуру материала на большую глубину, заполняет поры и при высыхании образует защитную пленку на обработанной поверхности. Смеси глубокого проникновения чаще производят в соответствии с ТУ 2316-003-11779802-99 и ГОСТ 28196-89.

Растворы применяются для обработки стен, потолка и пола перед дальнейшей отделкой поверхности.

Грунтовку глубокого проникновения выпускают в виде:

порошкообразного вещества, которое необходимо развести перед нанесением;
готовой для применения смеси.

Глубоко проникая в структуру материала, данный материал делает поверхность более прочной. За счет него происходит повышение уровня адгезии. Он снижает пористость обрабатываемой поверхности. В большинство составов входят специальные компоненты, благодаря которым стены, пол или потолок будут защищены от образования и распространения грибка, плесени. Грунтовка глубокого проникновения снижает расход лакокрасочных материалов и клеевых смесей на квадратный метр.

На грунтовочный слой декоративное покрытие ложится легко и равномерно.

Характеристики

Проникающий состав обладает рядом особых технических показателей.

Рассмотрим основные технические характеристики:

Глубина проникновения. Стандартный показатель составляет 0,5 см. У высококачественных смесей глубина проникновения может достигать 10 мм.
Расход материала может составлять от 50 до 300 г. на квадратный метр. Все зависит от конкретного вида грунтовочного состава и типа обрабатываемой поверхности.
Сухой остаток. Чем выше значение данного показателя, тем большее количество воды можно использовать для разбавления грунта без ухудшения его характеристик. После разведения смеси в воде показатель сухого остатка не должен опускаться ниже 5%.

Время высыхания покрытия зависит от состава смеси. При температуре 20 градусов Цельсия и влажности воздуха 70% среднее время высыхания может составлять от 1 до 3 часов.
Температура эксплуатации составляет от – 40 до + 60 градусов.
Диаметр частиц смеси может составлять от 0,05 до 0,15 мкм. Раствор можно наносить при температуре от 5 до 30 градусов.

Виды

В зависимости от состава грунтовочные смеси разделяют на несколько разновидностей. Каждый вид имеет свои отличительные особенности и свойства. Рассмотрим основные типы глубокопроникающих смесей:

Акриловые

Считаются универсальными, так как подходят практически для любого материала. Данные смеси отличаются хорошей впитываемостью и быстрым высыханием. Глубина проникновения раствора может достигать 10 мм. Отлично подходят для нанесения на стены перед поклейкой обоев.

Силиконовые

Такой грунт используют для внешних и внутренних работ. Силиконовые смеси хорошо укрепляют поверхность, обладают водоотталкивающим свойством. Силиконовая грунтовка подходит для обработки основания под разные виды отделочных материалов.

Алкидные

Алкидную грунтовку не рекомендуется применять для обработки осыпающихся поверхностей (например, штукатурки, гипса). Используют ее чаще для укрепления дерева и металла. Смесь укрепляет структуру и защищает ее от образования грибка, плесени. Данная грунтовка хорошо совместима с ПВА, нитрокрасками, алкидными лакокрасочными материалами и шпаклевкой на основе акрила.

Поливинилацетатные

Такие грунтовки используют исключительно под покраску. Они отличаются высокой скоростью высыхания и снижают расход красящих смесей.

Эпоксидные

Данные смеси применяют для обработки металла и бетона. Они улучшают уровень износостойкости покрытия.

Полистирольные

Такой грунт подходит для обработки деревянных и оштукатуренных поверхностей, он образует влагоустойчивую защитную пленку.

Недостатком данной грунтовки является высокий уровень токсичности.

Шеллаковые

Шеллаковые грунтовки используют для обработки деревянных поверхностей, они глубоко проникают в структуру материала и укрепляют его внутренние и внешние слои, препятствуют выходу смолы через волокна древесины наружу. После высыхания такой грунт образует на поверхности прочную защитную пленку. Укрывающая пленка защищает дерево от воздействия влаги и процессов гниения.

Силикатные

Такой грунт наносят под силикатные красящие смеси. Он образует прочное покрытие, которое обладает хорошими показателями паропроницаемости и устойчивости к перепадам температур. Отлично подходит для наружной отделки.

Латексные

Латексную грунтовку изготавливают на основе воды и полимеров. При помощи данного материала можно скрывать на поверхности въевшиеся пятна ржавчины, копоть и другие виды загрязнений. Подходит такая грунтовка для внешних и внутренних работ.

Водно-дисперсионные

Водно-дисперсионная грунтовка предназначена для наружных и внутренних работ. Отличается морозоустойчивостью, высоким уровнем адгезии, защищает поверхность от воздействий внешней среды. Высококонцентрированная смесь может разбавляться водой без потери качества своих свойств.

По назначению

Чтобы придать грунту дополнительные полезные свойства, производители добавляют в состав смесей специальные компоненты. За их счет грунтовка имеет классификацию по назначению.

Антигрибковая

Противогрибковая смесь обладает защитными свойствами против образования грибка и плесени. Такие свойства грунт приобретает, благодаря фунгицидам, входящим в его состав. Фунгициды не только предотвращают заражение поверхности грибком и плесенью, но и уничтожают уже зародившиеся микроорганизмы. Применяется такой состав и для уже зараженных поверхностей.

Антисептическая

По своим свойствам напоминает антигрибковую смесь. Разница заключается в том, что антисептический грунт применяется лишь для защиты покрытий от грибка и плесени. Обрабатывать грунтом с антисептиком можно только незараженную поверхность.

Фасадная укрепляющая

Используется для наружной отделки стен. Фасадная грунтовка укрепляет стены, улучшает водоотталкивающие характеристики основания.

Для бетона

Данная грунтовка делает поверхность шероховатой, улучшая адгезию. Такой грунт подходит только для внутренних отделочных работ.

Грунтовочные смеси имеют различие в оттенках. Под любую обрабатываемую поверхность можно подобрать смесь наиболее подходящую по оттенку, включая прозрачную разновидность. Под обои чаще наносят белую грунтовку. Это позволяет придать покрытию яркость, избегая искажения цвета.

Сфера применения

Глубокопроникающие смеси предназначены для поверхностей разного типа. Рассмотрим несколько видов.

Древесина

Поверхности из дерева подвержены влиянию внешних факторов, без качественной обработки и отделки они служат недолго. Смесь глубокого проникновения укрепляет структуру материала, повышает срок эксплуатации древесины. Антисептики, входящие в большинство составов грунтов глубокого проникновения, создадут дополнительную защиту против плесени и грибка.

Кирпич

Глубокопроникающие смеси укрепляют кирпичную поверхность, что позволяет продлить срок службы такого материала. Свойства состава позволяют связать поверхность с микротрещинами воедино.

Бетон

В первую очередь, в обработке грунтом глубокого проникновения нуждаются старые бетонные покрытия. Проникая в структуру поверхности, грунтовка выравнивает ее, связывая пыль.

Поверхность, оштукатуренная цементом

Грунт укрепляет поверхность и препятствует осыпанию. Кроме того, смесь уменьшает впитываемость штукатурки.

Глубокопроникающие смеси подходят далеко не для всех материалов. Поверхности из гипсокартона не рекомендуется обрабатывать таким грунтом. Гипсокартон высокого качества отличается прочной структурой, ему не нужно дополнительное укрепление. Структуру материала плохого качества невозможно укрепить при помощи грунта. Грунт глубокого проникновения подходит для обработки поверхностей с хорошей впитываемостью. По данной причине неуместно использовать грунт для оснований из металла.

Как выбрать?

Чтобы результат отделочных работ был качественным и оправдал ваши ожидания, стоит ответственно подойти к выбору грунтовочной смеси. Крайне важно приобрести смесь высокого качества. Дешевые составы не обеспечат должной защиты поверхности и хорошей адгезии. Перед покупкой стоит ознакомиться с наиболее популярными производителями и составом грунтующих смесей. При выборе грунтовки стоит учесть ряд значимых факторов. Выделим основные.

Тип отделочных работ

Изначально стоит определиться, для каких работ предназначена грунтовка. Разновидности для подготовки основания внутри помещения или снаружи различны. Для наружных работ лучше использовать специальные фасадные смеси, которые отличаются морозостойкостью и влагостойкостью. Для внутренних работ нужно подбирать более экологичную грунтовку, не содержащую токсины. Для подготовки поверхностей в помещениях с повышенным уровнем влажности нужно выбирать грунт с антисептиком.

Обрабатываемая поверхность

Стоит внимательно изучить маркировку: на ней должно быть указано, для каких конкретно типов основания подходит состав (стен, пола, потолка). Материал, на который будет наноситься грунт, различен, нельзя использовать для обработки первое, что приглянется на витрине магазина.

Дальнейший вид отделки

Имеет значение вид отделочных работ. Составы для обработки поверхности под покраску, облицовку плиткой, отделку декоративной штукатуркой и обоями различны.

Скорость высыхания

Для проведения внутренних работ лучше выбирать смеси, которые быстро сохнут. Это позволит сократить время на подготовку основания.

Расход

Расход грунтовки на 1 м2 зависит от типа обрабатываемого материала, состава смеси, температурного режима, при котором будет проводиться работа. Несмотря на то, что грунтовочные смеси глубокого проникновения изготавливаются на основе схожих ТУ и ГОСТов, составы грунта различных производителей могут отличаться.

Примерный расход грунтовки на один квадратный метр всегда указывается производителем на упаковке. На деле он может отличаться: пористые стены при первом нанесении грунта могут впитать его больше. Пропорции расхода грунтовки глубокого проникновения существенно отличаются от расхода других видов грунтующих смесей. В основном диапазон расхода на квадратный метр для нанесения одного слоя глубокопроникающего раствора составляет от 80 до 180 г.

Тонкости нанесения

Обработать стены, пол или потолок грунтовочной смесью своими руками не представляет особой сложности. Первым этапом проведения внутренних или наружных работ является подготовка поверхности. Если на ней имеется слой старой отделки, его нужно зачистить. Куски лакокрасочного покрытия или штукатурки можно удалить при помощи жесткого шпателя. После того, как старое покрытие полностью удалено, поверхность нужно очистить от грязи и пыли. Отмыть основание под грунт можно чистой влажной тряпкой или щеткой.

Следующим этапом будет подготовка раствора. Подробная инструкция по применению смеси указана на упаковке. Если вы приобрели жидкий грунт, такой материал уже готов к использованию. Сухие грунтовочные смеси нужно предварительно развести водой. Грунт необходимо наносить на поверхность с помощью кисточки или валика.

Участки с большой площадью лучше обрабатывать при помощи краскопульта.

Если обрабатываемая поверхность гладкая, удобнее использовать валик с длинным ворсом. После проведения грунтовочных работ она должна хорошо просохнуть перед дальнейшей отделкой.

Производители и отзывы

Перед тем, как приобрести грунт глубокого проникновения для проведения отделочных работ, рекомендуется ознакомиться с наиболее известными производителями и отзывами на их продукцию. Только грунт высокого качества укрепит обрабатываемую поверхность и облегчит работу по нанесению финишного покрытия. В рейтинг популярных товаров вошла продукция нескольких марок.

«Оптимист»

Компания производит отдельную линейку глубокопроникающих грунтовочных покрытий. Фасадная силиконовая глубокопроникающая грунтовка применяется для проведения работ вне помещения. Она повышает уровень влагостойкости основания и стабилизирует показатели паропроницаемости, укрепляет рыхлые и непрочные основания.

Интерьерный грунт на акриловой основе можно наносить на старый слой масляной краски или алкидной эмали. Подходит он для грунтования пола. В составе содержится антисептик, препятствующий возникновению плесени и грибка. Такой грунт укрепляет структуру обрабатываемого покрытия.

Грунт-концентрат проникающий обеспечивает хорошую адгезию. Образует на поверхности влагоизоляционную защитную пленку. Покупатели выделяют легкость нанесения, хорошую впитываемость, небольшой расход раствора, небольшое время высыхания. Данная грунтовочная смесь обладает отличными характеристиками и высоким качеством. Среди недостатков материала покупатели выделяют неприятный запах и слишком жидкую консистенцию.

«Старатели»

Глубокопроникающий раствор «Старатели» применим для проведения внешних и внутренних работ. Он укрепляет основание и снижает расход лакокрасочного сырья при дальнейшей отделке. В состав грунтовочного раствора входят антисептические добавки, которые защищают поверхность от распространения грибка и плесени. Отзывы о данном продукте преимущественно положительные.

Среди преимуществ глубокопроникающего грунта «Старатели» выделяют:

ровное и прочное покрытие после нанесения;
отличное соотношение цены и качества;
высокую скорость высыхания.

К незначительным минусам относят небольшой запах, а также сложность удаления смеси с не предназначенных для обработки поверхностей.

«Текс»

Компания «Текс» производит отдельную линейку глубокопроникающих грунтовочных смесей. Глубокопроникающий раствор два в одном «Универсал» предназначен для нанесения на пористое основание перед покраской водно-дисперсионными смесями, шпатлеванием, отделкой плиточными материалами. Водно-дисперсионную смесь «Эконом» необходимо использовать для внутренней отделки. Можно применять в помещениях с высоким уровнем влажности. Подходит она в качестве покрытия под обои. Глубокопроникающий раствор «Оптимум» можно применять для внутренней и наружной отделки, он улучшает адгезию, снижает расход лакокрасочных материалов при дальнейшей отделке.

Отзывы о продукции торговой марки преимущественно положительные.

Покупатели выделяют следующие особенности:

невысокую стоимость;
хорошее качество;
короткое время высыхания;
хорошую адгезию;
укрепление структуры поверхности;
хорошую впитываемость.

Незначительным недостатком некоторые покупатели считают неприятный запах раствора.

«Боларс»

Фирма «Боларс» выпускает высококачественные материалы для профессионального строительства на современном высокотехнологичном оборудовании. Данная фирма имеет в своем арсенале собственные научные лаборатории по определению качества сырья и готовых материалов. Грунт глубокого проникновения «Боларс» укрепляет структуру пористых поверхностей, улучшают адгезию и сокращают расход лакокрасочных материалов при дальнейшей отделке. Грунтовочная смесь «Боларс» хорошо зарекомендовала себя на рынке строительных материалов, имеет только положительные отзывы покупателей. Потребители отмечают небольшой расход смеси, быстрое высыхание.

«Лакра»

Компания «Лакра» производит лакокрасочную продукцию с применением современных технологий. Продукция данной фирмы отличается высоким качеством и экологичностью. Грунтовка глубокого проникновения «Лакра» выпускается в трех модификациях, включая интерьерную грунтовку с добавками против плесени, аналогичную на акриловой основе и универсальную с добавками против плесени.

Наибольшим спросом пользуются интерьерная смесь с добавками против плесени и универсальная грунтовка. Данные материалы имеют только положительные отзывы.

Потребители выделяют следующие преимущества грунта «Лакра»:

невысокую стоимость;
прочное покрытие;
высокое качество;
экономию расхода лакокрасочных и клеевых смесей;
хорошее укрепление поверхности.

Ceresit

Компания Ceresit самостоятельно проводит научно-исследовательские работы и разрабатывает уникальные технологии изготовления отделочных материалов. Грунтовка глубокого проникновения Ceresit CT 17 – одна из самых востребованных на рынке грунтовочных смесей.

Покупатели выделяют следующие преимущества продукта:

подходит для всех типов впитывающих поверхностей;
имеет короткое время высыхания;
легко наносится;
отличается высоким качеством;
повышает уровень адгезии;
укрепляет структуру поверхности;
связывает пыль;
снижает впитываемость поверхности;
снижает расход лакокрасочных материалов при дальнейшей отделке;
экономична в использовании.

Среди недостатков выделяют высокую стоимость материала и неприятный запах.

Knauf

Knauf – крупнейший производитель строительных материалов, известный во всем мире. Компания изготавливает экологичные материалы высокого качества. Укрепляющий глубокопроникающий грунт «Кнауф-Тифенгрунд» изготавливается на основе полимерной дисперсии. Данная смесь подходит для проведения внутренних и наружных работ. Покупатели отмечают высокое качество материала «Кнауф-Тифенгрунд» и приемлемую цену. Среди других преимуществ выделяют хорошую адгезию и высокую скорость высыхания. Недостатки покупатели не выявили.

«Декарт»

Большим спросом на российском рынке пользуется продукция компании «Декарт», выпускаемая торговой маркой «Эксперт». Глубокопроникающий раствор «Эксперт» изготавливают на акриловой основе из импортного высококачественного сырья. Данный материал подходит для внутренних и внешних подготовительных работ. Применяется перед окрашиванием или шпатлеванием поверхности. Покупатели отмечают хороший уровень адгезии, данная грунтовка уменьшает впитываемость поверхности. Несмотря на то, что грунт «Эксперт» справляется с основными задачами, потребители говорят о невысоком качестве смеси.

Axton

Axton предлагает широкий ассортимент грунтовочных покрытий. Латексная глубокопроникающая смесь Axton предназначена для улучшения адгезии и укрепления структуры основания перед финишной отделкой. Покупатели отмечают легкость нанесения смеси, улучшение сцепляемости поверхности с другими материалами и невысокую стоимость материала. К незначительным минусам раствора относят неприятный запах.

«Основит»

Фирма «Основит» является одним из лидеров по производству сухих отделочных смесей в России. Компания разрабатывает собственные уникальные технологии изготовления строительных материалов. Контроль качества проходит не только готовая продукция, но и сырье, используемое при производстве грунтовки. Глубокопроникащую смесь «Основит Дипконт LP53» можно использовать для внешних и внутренних ремонтных работ. Смесь предназначена для укрепления старых непрочных поверхностей, имеющих рыхлую структуру. Покупатели отмечают хороший уровень адгезии обработанного основания и небольшой расход грунтовочной смеси.

Unis

Компания Unis занимается производством материалов для ремонта и строительства с 1994 года. Фирма предлагает широкий ассортимент готовых смесей для отделочных и строительных работ. Рецептура изготовления строительных материалов разрабатывается на базе собственного научно-исследовательского центра. Продукция Unis обладает хорошими техническими характеристиками и отвечает высоким международным стандартам.

Глубокопроникающий грунт Unis можно применять для внешних и внутренних работ в сухих, неотапливаемых и влажных помещениях. Смесь укрепляет старые и рыхлые основания, способствует хорошей адгезии.

Покупатели выделяют следующие преимущества продукта:

хорошую адгезию;
небольшой расход смеси;
высокую скорость высыхания;
отсутствие неприятного запаха;
хорошую впитываемость;
ровное покрытие.

Полезные рекомендации

Некоторые грунтовочные смеси глубокого проникновения имеют в составе вредные вещества и обладают токсичностью.

При работе с данными растворами нужно соблюдать технику безопасности:

Грунт сушит кожу, поэтому нужно избегать попадания смеси на кожаные покровы. Работу необходимо проводить в защитной одежде. Руки нужно защитить перчатками.
Для защиты органов дыхательной системы от вредных паров используйте респиратор или маску. Если отделочные работы проводятся внутри помещения, необходимо позаботиться о тщательном проветривании комнаты.
Для защиты слизистой оболочки глаз необходимо использовать специальные строительные очки.
Если необходимо обработать грунтовочной смесью поверхность, обладающую плотной структурой, лучше использовать бетонконтакт. В его состав входит кварцевый песок, что обеспечивает хорошую адгезию.

О том, как загрунтовать стену, смотрите в следующем видео.

проникающая грунтовка для стен и потолков, универсальные составы для внутренних работ

Задумав отделку стен, потолка или пола, хочется выполнить работу максимально практично, даже если рабочая поверхность выглядит старо и пористо. С этим без труда справляются мастера, так как секрет успеха сосредоточен в использовании специального средства для обработки поверхности. Разберемся вместе в назначении акриловой грунтовки глубокого проникновения и технологии ее нанесения.

Особенности

Акриловая грунтовка глубокого проникновения представляет собой специальный материал для обработки поверхности перед выполнением отделочных работ, в готовом виде по консистенции напоминающий молоко.

Цвет может быть разным: чаще он прозрачный, иногда белый, розоватый, светло-серый. Данная грунтовка является одной из разновидностей акрилового грунта. Она не является универсальным средством, поэтому покупка материала должна основываться строго на назначении препарата.

Сегодня без такого грунта не обходится ни один тип отделочных работ. Материал немного липкий, если сразу не смыть с рук, удаляется с трудом.

Продается преимущественно в банках и канистрах. Объем зависит от стандартов производителя. Чаще такие составы выпускают объемом 10 л.

При попадании в глаза нужно срочно промыть их обычной водой. Кожу рук не разъедает, в зависимости от основы может быть экологичным без запаха или с небольшим специфическим ароматом, который не препятствует рабочему процессу.

Данный материал продается в виде сухой смеси и готового к обработке раствора. В первом случае это порошок, который необходимо разводить водой согласно инструкции.

Воду используют прохладную: от горячей пострадают эксплуатационные характеристики строительного продукта. Это удобно, так как такого материала обычно хватает для обработки пола, стен и потолка просторной комнаты.

Остатки можно хранить в течение 12 месяцев, плотно закрыв крышку и убрав сырье в темное место. Хранить его на морозе недопустимо. Срок годности акриловой грунтовки глубокого проникновения составляет 2 года с момента выпуска. Мастера не рекомендуют пользоваться ей после того, как закончится срок годности.

Преимущества и недостатки

Акриловый грунт глубокого проникновения имеет массу достоинств. Такое средство укрепляет основание, делая его структуру достаточно прочной. Использовать этот состав можно для наружных и внутренних работ. Он подходит для самых ненадежных оснований, которые внешне не вселяют уверенность в успехи облицовки. У данной грунтовки высокая вязкость. Ее удобством является водорастворимость.

Использование акрилового грунта позволяет сэкономить на количестве клеевого состава либо краски: обработанная поверхность больше не впитывает жидкость в большом объеме, поэтому быстро не высыхает и позволяет провести отделочные работы аккуратно, без спешки.

После обработки данной грунтовкой темных поверхностей краска ложится равномерно без непрокрашенных участков, полос и иных дефектов. При этом глянец поверхности более выражен. Касаемо остальных компонентов отделки можно отметить: нанесение плиточного и обойного клея после применения грунта становится более равномерным, что упрощает отделку.

Латексной грунтовке присуща паропроницаемость. Несмотря на то, что она проникает вглубь основания и укрепляет даже пористые поверхности, на ней не будут появляться микроорганизмы и плесень. При этом сама грунтовка после нанесения не тормозит облицовочные работы: сохнет она быстро даже при обычной комнатной температуре. Время высыхания может быть разным, так как оно зависит от типа используемого растворителя (быстрого, медленного, классического).

Недостатком акриловой грунтовки является некоторое неудобство разведения концентрата, что нравится не всем. В основном на это сетуют новички, которые боятся в точности воссоздать нужную консистенцию, что приводит к увеличению расхода грунта.

Несмотря на тот факт, что грунтовкой может обрабатывать разный тип поверхности, не каждый состав подходит для обработки темных металлов. Поэтому использование данного средства при облицовке допустимо только в случае, если нужный тип поверхности есть в списке, отмечен на упаковке.

Для чего нужна?

Акриловая (или латексная) грунтовка подходит для поверхностей разного состава. Действие материала основано на придании обрабатываемой плоскости высокого сцепления с последующим нанесенным материалом. Она нужна для того, чтобы отделка держалась на поверхности максимально долго.

Данный грунт не просто обрабатывает верхний слой основания под отделку: он проникает на глубину от 5 до 10 см вглубь плоскости, на которую нанесен.

Действие основано на проникающей способности, которая позволяет укрепить стены, выполненные застройщиком с нарушением технологии. Это чаще бетонные стены или штукатурка, в которых песка заметно больше нормы. Такие поверхности осыпаются, что затрудняет процесс отделки и может сказаться на конечном результате. Действие акрилового грунта позволяет проникнуть глубоко в трещины и проблемные места поверхностей.

Материал связывает не только микротрещины: он соединяет пыль и заставляет все зоны поверхности с риском плохой прочности максимально удерживать облицовочный материал. При этом вовсе не важно, обои это, керамическая, потолочная плитка или наливной пол. Интересной особенностью является образование на поверхности в процессе застывания шероховатой сетки, которая выравнивает основание, выполняя его подготовку к последующей обработке.

Акриловая грунтовка подходит для обработки цементно-бетонных стяжек, ею можно обрабатывать деревянные, штукатуреные типы поверхностей, известняк. Она склеит мельчайшие частицы основания, будет способствовать предотвращению образования синевы и гниения.

Этот грунт является защитой от сырости. Использовать его можно при подготовке поверхности под паркет, эмали, мраморную крошку, структурную штукатурку. Она везде воздаст монолитную ровную основу.

Технология нанесения

Нанесение грунта на поверхность легче, чем кажется на первый взгляд.

При работе понадобятся:

поролоновый валик;
плоская кисть;
маленькая плоская кисть;
перчатки;
плоская емкость под грунтовку.

В случае с сухим концентратом к данному набору стоит добавить тару для разведения материала, который разводят строго в пропорциях, указанных производителем (обычно 1: 4).

Размешивание осуществляют до тех пор, пока состав не станет однородным. При этом может понадобиться маска, чтобы сухой состав не попал в легкие.

После приготовления необходимого инвентаря и самой грунтовки приступают к обработке поверхностей. Грунт наливают в плоскую емкость, примерно на 1/3 закрывая по объему размещенный в ней валик. Больше наливать не стоит: раствор будет стекать с валика в большом количестве, что неудобно при обработке поверхностей стен или потолков. Валик удобен тем, что с его помощью время, потраченное на обработку поверхности, сокращается в два раза.

Заливать стены нет необходимости: у грунтовки и так высокая проникающая способность. Однако и экономить тоже не следует: главное, чтобы при прокатке поверхности не было брызг. Движения не должны быть резкими: это особенно актуально, если ремонт в комнате частичный. Если грунт попадет, скажем, на обои, на них могут остаться пятна.

Раствор набирают на валик и прокатывают им поверхности под дальнейшую облицовку. Поскольку в любой работе не обойтись без обработки углов стыков и неудобных мест, рабочий инструмент меняют на кисть нужного размера. Валик не справляется с аккуратной обработкой углов: обычно в таком случае не избежать потеков по стенам.

Кисть позволит избежать ненужного расхода, сделает обработку более аккуратной.

Когда все плоскости обработаны, нужно сразу удалить остатки грунтовки с инструментов и тары. Если оставить это на потом, поролон и щетина кисти станут дубовыми. После их застывания кисти и шубку из поролона придется выкинуть. В процессе работы материал стоит подливать в емкость понемногу: вылить остатки обратно в общую канистру не получится (на них будут мельчайшие частицы пыли либо микрофрагменты цементной стяжки).

Грунтуют поверхность дважды. При этом повторное применение грунта возможно только после того, как высохнет первый слой.

Что учесть?

Чтобы проведение отделочных работ не осложнилось из-за выбора неправильной грунтовки или неправильного ее нанесения, стоит учесть несколько рекомендаций.

Специалисты рекомендуют при покупке обращать внимание на срок годности. Если до его конца осталось менее месяца, а продукт заведомо может остаться, либо берут его впритык с докупкой, либо выбирают материал другой марки.

Предпочтительней пользоваться грунтом проверенной компании с хорошей репутацией: дешевые разновидности не отличаются хорошей вязкостью, они не смогут создать крепкую кристаллическую сетку и выровнять основание на должном уровне.

Чтобы сцепление было максимальным, перед нанесением самой грунтовки поверхность нужно избавить от пыли, загрязнений и особенно жировых пятен, препятствующих качественной отделке. Распределяясь посредством валика по поверхности облицовочного полотна, пыль, песчинки будут препятствовать дальнейшей поклейке обоев, являясь причиной мелких пузырей под обоями.

Производить облицовку можно после полного высыхания второго слоя грунта. Это определяется тем, что при касании к поверхности она не липнет. Грунтуют стены перед обработкой. Если ремонт не планируется еще в течение месяца, нет смыла наносить грунтовку заранее.

Нельзя обрабатывать пол грунтовкой, если он не подготовлен и имеются существенные трещины: это приведет к протеканию состава. Большие проблемы он не исправит, для этого нужно воспользоваться цементным составом.

Инструкцию по нанесению грунтовки глубокого проникновения смотрите ниже.

нужно ли обязательно грунтовать перед поклейкой, какую выбрать, чем обработать стены перед нанесением жидких обоев, сколько сохнет

С появлением на рынке новых строительных материалов появилась возможность улучшить качество ремонтных и отделочных работ. В нашу повседневную жизнь вошло слово «евроремонт», что подразумевает отделку особого качества.

При строительстве не может быть сделана сразу идеальная поверхность, поэтому необходимо производить дополнительные работы, связанные с облагораживанием, ремонтом, выравниванием, укреплением. Этот процесс называют внутренней и наружной отделкой. Отделка включает в себя монтажные и отделочные работы.

Особенности

Монтажные работы – это создание поверхности при помощи различных плит: ДСП, ДВП, ОСБ, оргалита, шифера, фанеры, гипсокартона, дерева. А также ПВХ материала, керамической плитки и др. К отделочным работам относят штукатурку, шпаклевку, побелку, покраску, покрытие лаком, наклейку обоев. Очень важной составляющей отделки является применение в работе грунтовки.

Самое главное предназначение грунтовок – это повышение адгезии. «Адгезия» переводится с латыни как «прилипание». Возникает эта связь по причине сцепления молекул материалов из-за химического воздействия веществ.

Прогрунтованная поверхность упрочняет сцепление разнородных материалов с основанием. Она не дает развиваться плесени и препятствует возникновению грибка, изолирует проникновение ржавчины на поверхность, сокращает расход краски и обойного клея. Применение грунтовки при наклейке обоев повышает комфортность и качество работ и уменьшает трудозатраты.

Материалы, используемые при отделке внутренних помещений, не могут обходиться без обязательной пропитки. Этого требует техпроцесс поклейки обоев.

Виды

На рынке строительных материалов имеется большой выбор пропитывающих составов для грунтовки различных поверхностей. Основная их задача – это укрепление основания. Но существуют еще и дополнительные функции.

Для применения с разными материалами существуют несколько видов, отличающихся своим составом. Одни из них сделаны на водной основе. Это акриловые, латексные, силикатные и силиконовые грунтовки. Другие производятся на основе гипса, цемента или извести. Это природные материалы. Есть грунтовки на органических растворителях. Это растворы с латексом, алкидами или полиуретаном.

Предназначение грунтовок может быть разным, но чаще всего они успешно взаимозаменяют друг друга. Например, грунтовка глубокого проникновения сочетает в себе как укрепляющие качества, так и водоотталкивающие и адгезивные функции.

Классификация грунтовки:

Изолирующие. Они имеют в своём составе смолы или масла, различного вида клеи, которые являются плёнкообразующими веществами. Гидроизолирующий слой создает влагоотталкивающую поверхность, что особенно важно перед поклейкой обоев.
Антикоррозионные. Созданные специально для металла, они различаются воздействием на материал. При попадании влаги на металл происходит химическая реакция, материал начинает окисляться, что приводит к появлению ржавчины. Она негативно сказывается на внешнем виде помещения, портит обои. Во избежание этого производят обработку различного вида антикоррозионными грунтовками:
1. фосфатирующая грунтовка, содержащая ортофосфорную кислоту;
2. пассивирующая грунтовка образует оксидную плёнку. Под воздействием пропитки металл принимает пассивную химическую форму, а пленка защищает его от влаги;
3. протекторная грунтовка включает в себя цинковую пыль, которая при попадании влаги на металл разрушается, тем самым защищая материал.

Универсальная грунтовка представляет собой водный раствор с добавлением химических соединений. Проникая глубоко внутрь поверхности, она увеличивает адгезию материалов, удаляет мелкие частицы пыли. Она универсальная, потому что применяется для различных оснований и материалов. Подходит как для внутреннего, так и для внешнего применения.
Антигрибковые грунтовки препятствуют, а некоторые составы даже активно борются с плесенью и грибком. Одновременно они скрепляют поверхность и увеличивают сцепку материалов. Они могут использоваться и в целях профилактики.
Грунтовки бетоконтакт. В составе они имеют наполнитель в виде кварцевого или мраморного песка. Применяются они для работы со штукатуркой или керамической плиткой. Для обоев она не подходит.

Технические характеристики

Характеристики грунтовки, как правило, указываются на этикетке или упаковке продукта:

какой цвет она имеет. В основном, грунтовки при высыхании не изменяют цвет покрытия, на которые их наносят. Они прозрачные. Но бывает укрывающая пропитка, которая красит стену в белый цвет. Происходит это благодаря содержанию в ней большого количества пигментирующих веществ;
расход в один слой г/м2. Эта характеристика нужна для выбора количества приобретаемого материала. Она зависит и от поверхности применения. Если количества грунтовки немного не хватает, а докупить нет возможности, то остаток раствора можно разбавить той основой, на которой она изготовлена;
время высыхания. Каждый производитель руководствуется испытательными показаниями товара. Указанное на этикетке время высыхания поможет не нарушить технический процесс;
вид обрабатываемого материала. На этикетке можно прочесть, для какого вида поверхностей применяется данный вид;
тип использования. Для внутренних или внешних работ;
способ нанесения.

Остальные параметры могут пригодиться только узким специалистам.

Какую выбрать и зачем нужна?

Для стен под обои подойдут следующие виды грунтовок:

Акриловая. Эта универсальная пропитка идеально подойдет для обработки деревянных, бетонных и кирпичных стен. Она изготовлена на основе акриловых полимеров, глубоко проникает в поры поверхности и благодаря этому хорошо укрепляет рыхлые материалы. Не имеет резкого запаха, быстро сохнет, экологически чистая и имеет малый расход материала.
Алкидная. Такая пропитка имеет хорошие антикоррозийные свойства. При ее изготовлении применяют цинк и фосфат. Она экологически чистая и хорошо подойдет для обработки металла и дерева, стен, изготовленных из ДВП, ДСП и плит ОСБ. Разбавляется уайт-спиритом. Не подходит для работы с гипсокартоном и штукатуркой. Благодаря содержанию в ней пигментирующих частиц образует белую поверхность. Может применяться как финишное покрытие.
Латексная. Подходит к любым поверхностям. Быстросохнущая.
Минеральная. Применяется для бетона, кирпича и оштукатуренных поверхностей. Изготавливается она с использованием цемента, извести и гипса.
Обычные клеевые. Самый дешевый вариант.

Для голых стен применяют грунтовку глубокого проникновения. Это стены, изготовленные из пено- и газоблоков, старые известковые и цементные штукатурки. После нанесения грунтовки она впитывается в основание на глубину до 15 мм. Заполняет поры, скрепляя материал и образуя прочную пленку, которая обеспечит качественное соединение с отделочным материалом.

Такие стены хорошо впитывают влагу. Поэтому чаще всего требуется нанесение второго слоя, которым нужно загрунтовать поверхность после полного высыхания первого слоя.

Наносится грунтовка всегда валиком и кистью. При больших объемах работ можно применить пульверизатор, не забывая про защитную одежду и респиратор.

Если нет особых требований к основе, выбирают универсальную грунтовку. Это латексная и акриловая пропитки на водной основе. Они дешевле специализированных составов, быстро сохнут, экономично расходуются, не имеют химического запаха. Применение таких грунтовок (праймеров) обеспечит все предъявляемые требования.

Для деревянных покрытий выбирают алкидную пропитку. Она хорошо скрывает смолистые сучки, которые не будут проступать долгое время. Подходит она для ДВП, ДСП и ОСБ плит, хорошо изолирует железные основания.

Для стен оштукатуренных, кирпичных, бетонных, а также пеноблоков, применяют минеральные и силикатные пропитки.

Выбираем под будущее покрытие

Самый распространенный вид окончательной (чистовой) отделки помещения – обои. За время их существования мало что изменилось в методе проведения работ. Появились лишь дополнительные элементы подготовительных работ и расширилось разнообразие самих обоев.

Обои различаются по нескольким типам и видам.

По влагостойкости:

обычные. Это бумажные и акриловые, они не любят влагу и механические воздействия;
водостойкие – терпимые к попаданию на них воды;
моющиеся – при эксплуатации можно применять неагрессивные моющиеся средства в местах сильного загрязнения и щетку;
супермоющиеся – в основном, это разного вида виниловые обои, влагостойкие и износостойкие.

По материалу и требованиям к качеству отделки основания, на которое они будут клеиться:

Бумажные. Они бывают многослойными и однослойными, проявляют все дефекты стен, поэтому основание должно быть идеально ровным и однотонным. От клея они намокают и разбухают. Если основание зашпаклевано беспесчанкой и не прогрунтовано, обои потянут ее за собой и вырвут. Исключением может быть способ наклейки внахлест.

Для создания одного тона применяют пигментированную пропитку. Она создаёт белую поверхность, которая препятствует проявлению разнотонных участков на стене. С ней легче работать, так как сразу видны непрокрашенные участки;

Флизелиновые. В их основе лежит нетканое волокно из целлюлозных или синтетических волокон. При выборе обоев нужно обратить внимание на их плотность. Они бывают легкие, средние и тяжелые. Качество отделки может быть не идеальным, их плотность может скрыть небольшие изъяны основания;
Виниловые. Благодаря слою винила на основании их можно использовать в помещениях с повышенной влажностью. Они прочные, стойкие к выцветанию, их можно мыть. Для них подойдет относительно ровная поверхность, обработанная пигментированной пропиткой;

Под покраску. Разновидность флизелиновых обоев. Из-за того, что эти обои покрывают водоэмульсионной краской, основание должно быть обязательно обработано грунтовкой. Если этого не сделать, обои будут отходить при покраске;
Жидкие. Фактически это подвид штукатурки. Цена на жидкие обои достаточно высока. Для экономии средств желательно сделать ровную и прочную поверхность, используя беспесчаную штукатурку и покрыть её грунтовкой.

Как правильно использовать?

Когда существовали только бумажные обои, для смены интерьера достаточно было наклеить новые полосы материала на уже существующие. Таким образом утепляли бетонную стену. Иногда для этого даже предварительно наклеивали газеты. Сейчас появилось много новых видов обоев на любой вкус и с различными свойствами. Да и стены стали более разнообразными.

При проведении ремонта демонтируются старые обои. Удобнее всего использовать при этом ручной пульверизатор с тёплой водой и шпатель. Если отслужившие обои плохо отстают от поверхности, на них можно сделать надрезы острым ножом. Тогда вода быстрее будет проникать под них.

Виниловые обои на флизелиновой основе можно удалить в два этапа. Сначала обрывается виниловое покрытие, а затем уже смачивается остаток водой. Вместо воды можно использовать уксусный раствор. Существуют ещё специальные средства, помогающие удалить обои.

Грунтовать поверхность в этом случае не обязательно, так как стена уже пропитана клеем. Использование грунтовки необходимо для новых поверхностей.

Технология обработки поверхности зависит от материала стен:

Бетонная поверхность

Нужно очистить её от пыли. Полости от отвалившегося щебня и стыки между плит зашпаклевать и зачистить наждачной бумагой. Использовать для пропитки бетона можно разбавленный клей.

Для улучшения адгезии предпочтительнее применить универсальную пропитку, подойдет и минеральный грунт для цементных смесей. Для качественного результата стены шпатлюют беспесчанкой.

Штукатурка

Когда штукатурка не новая, её необходимо простучать для того, чтобы выяснить, не отошла ли она от основания. В местах глухих звуков она отбивается от основы. Эти места пропитываются праймером глубокого проникновения. После высыхания они подштукатуриваются.

Если штукатурка старая или сыпется, её необходимо укрепить грунтовкой глубокого проникновения. В зависимости от состояния наносят два слоя. Когда основание крепкое, то поступают так же, как и с бетонной стеной.

Гипсокартон

Поверхность под обои можно не обрабатывать. Но все же желательно покрыть гипсокартон универсальным грунтом. Применять пропитку на основе ПВА не желательно – обои пристанут к основе намертво, снять их будет очень сложно. Швы у гипсокартона обязательно шпаклюются. В итоге получается поверхность неоднородного цвета, которая может проявиться сквозь обои.

Чтобы избежать этого, гипсокартон покрывают тонким слоем шпаклевки для выравнивания стен по всему периметру. После чего поверхность нужно прогрунтовать. Для этого не помешает пигментная грунтовка.

Масляная краска

Краску убирают при помощи строительного фена и шпателя. Избавиться от неё можно химическим способом. Для этого необходимо приобрести специальное средство, обработать им поверхность и зачистить железной щеткой. При использовании для этих целей болгарки будет очень много пыли, а у шлифовальной машинки будет моментально забиваться наждачная бумага.

Для того, чтобы качественно подготовить такую стену под поклейку обоев, нужна шпатлёвка. Для этого делают насечки на стене при помощи топора, молотка или стамески. Пропитывают основание универсальной грунтовкой.

После того, как она высохнет, шпатлюют смесью для выравнивания стен. Под обои достаточно одного слоя шпаклевки. После высыхания шпаклёвки её грунтуют.

Если нет возможности избавиться от краски или воспользоваться шпаклевкой, поступают следующим образом. Прежде чем что-то делать, стены необходимо обязательно обезжирить. Старой крашеной поверхности необходимо придать шероховатость для лучшего сцепления. Для этого её обрабатывают наждачной бумагой и пропитывают универсальной грунтовкой.

На крашеные стены клеить обои под покраску без дополнительной обработки нельзя. При нанесении краски влага, содержащаяся в ней, впитываться в стену не будет. Обои станут набухать, клей под ними размокнет и под своей тяжестью они отпадут.

Дерево и металл

Для данных оснований применяют алкидную грунтовку. Металл и дерево, покрытое лаком, предварительно зачищают наждаком. Праймер наносят в два слоя.

Для качественного результата внутренние стены шпатлюют сухими шпаклевками. Способ клеить обои внахлёст ушел в прошлое, сейчас все обои наклеивают стык в стык. Для этого создают идеально ровную поверхность.

Шпатлюют стены из ДСП, ОСБ, гипсокартона, цементных и известковых штукатурок, покрытые масляной краской или алкидной эмалью. Раствор наносят на стены и потолок толщиной не более 3-4 мм в несколько слоев. Для первого слоя используют шпаклёвку с большей зернистостью. Её задача – выровнять плоскость. Сверху покрывают конечным слоем мелкой зернистости для придания поверхности идеального вида.

Для работ используют два шпателя. Один – для нанесения смеси на поверхность, другим разбавляют раствор и накладывают на первый шпатель. После нанесения раствора на стену и его высыхания поверхность шкурят малярной сеткой или мелкой наждачной шкуркой, закреплённой на затирке. Пыль, образовавшуюся при затирании, смахивают со стены веником или щёткой. Идеально будет применение пылесоса.

Зашпатлёванная поверхность рыхлая и очень хорошо впитывает влагу. Её обязательно пропитывают праймером, что способствует скреплению состава и экономит расход обойного клея.

Как развести?

В большинстве случаев пропитка продаётся в жидком состоянии, уже готовая к применению. Но бывают случаи, когда она имеет концентрированную консистенцию. Это делается для экономии тары при транспортировке.

Такую пропитку необходимо развести перед применением. Выпускается она и в виде порошка. Пропорции для разведения указываются производителем. Обычно для разбавления используется вода, но бывают случаи, когда в качестве разбавителя используют химические вещества. Например, алкидную пропитку можно разбавить уайт-спиритом.

Сколько сохнет?

Обои можно клеить сразу после высыхания грунтовки. Время высыхания указывается производителем на этикетке изделия. Количество времени для этого зависит от внешних факторов: влажности в помещении, возможности проветривания (хотя это не рекомендуется) и температуры окружающей среды. Также время высыхания зависит от пропитываемой поверхности. На пористых основаниях грунтовка сохнет быстрее.

Разные праймеры отличаются временем высыхания. При комнатной температуре 18-25 градусов и влажности 60 процентов акриловые пропитки сохнут 4-6 часов, алкидные – 10-16, глифталевые 24 часа. Для грунтовки глубокого проникновения потребуется ждать 12 часов.

Специалисты-маляры, имеющие большой опыт таких работ, придерживаются своего графика. При проведении работы самостоятельно лучше придерживаться советов производителя.

Удачные примеры и варианты

Грунтовку можно сделать своими руками.

Для приготовления грунтовки глубокого проникновения понадобится строительный клей ПВА и вода в пропорции 1 литр клея на 8 литров воды. В клей добавляют воду, перемешивая до однородного состояния. Важно не допустить большой концентрации клея. Разведенный водой он должен впитаться в основание. Если его будет много, то образуется плёнка, которая станет отслаиваться.

Для создания шероховатой основы, которая улучшает сцепляемость с обоями, добавляют природный мел или цемент и тщательно перемешивают. На 10 литров хватит одного мастерка. На всякий случай раствор процеживают через двухслойную марлю. Такая грунтовка укрепляет и защищает от влаги поверхность, оказывает антисептическое воздействие.

С клеем ПВА нужно быть осторожными – с течением времени он имеет свойство желтеть. Нужно избегать попадания его на обои и стыки между ними.

Для повышения прочности основания и борьбы с грибком можно приготовить грунтовку с применением медного купороса, столярного клея и хозяйственного мыла. Из-за того, что грунтовка будет вариться на огне, применять алюминиевые и стальные ёмкости нельзя, потому что купорос войдет с ними в химическую реакцию.

В семи литрах кипящей воды растворяют хозяйственное мыло. Предварительно его можно измельчить, натерев на крупной тёрке для уменьшения времени растворения. К кипящему раствору добавляют столярный клей и медный купорос. Тщательно перемешивают и варят грунтовку на медленном огне примерно полчаса.

Каждые пять минут перемешивают раствор, чтобы избежать появления комочков. Через тридцать минут готовую грунтовку процеживают через сито. Когда раствор остынет, грунтовка готова к работе. Такой праймер подойдёт для укрепления блочных, кирпичных и оштукатуренных стен.

Для улучшения адгезии можно приготовить универсальную грунтовку из квасцов (алюмокалиевых), порошка мела, олифы и сухого малярного клея. Тщательно перемешивая, смесь доводят до однородной массы.

Если грунтовка получается слишком тягучей, то её разбавляют горячей водой до нужного состояния. Такую грунтовку процеживать не нужно.

Хранить раствор долго нельзя, он быстро потеряет свои свойства, поэтому его готовят непосредственно перед применением. Такая грунтовка подойдёт для любой глянцевой или окрашенной поверхности, например, стекла, оргалита, металла, жестяных полотен.

Важные моменты

Грунтовку можно сделать самостоятельно, но лучше воспользоваться профессиональным промышленным составом. Его выпускают уже готовым к применению, в виде порошка, который разбавляется разными основами или концентрированным.

Использовать грунтовку необходимо до того, как она потеряет свои свойства. При использовании клея ПВА нужно быть особенно аккуратным: попадая на стыки обоев, он оставляет после себя след. Обязательно нужно следить, чтобы грунтовка не попала и не высохла на оконном стекле. Химическим способом избавиться от ее брызг невозможно, она удаляется только механическим методом, но при этом неминуемо поцарапается стекло.

Также нужно беречь мебель и напольное покрытие. При использовании грунтовки на водной основе элементы из железа могут окислиться, и ржавчина проступит сквозь обои. Такие места нужно предварительно изолировать масляной краской, лаком, заклеить фольгой. Грунтование нужно делать, избегая перепада температуры в помещении. Этого нужно придерживаться и при поклейке обоев.

Еще больше советов и рекомендаций о том, как правильно грунтовать стены, смотрите в следующем видео.

какой лучше выбрать для внутренних и наружных работ

От правильной подготовки стен во многом зависят такие параметры, как общее качество отделки, вне зависимости от разновидностей поверхности. Грунтовка глубокого проникновения в этом плане самая эффективная, она лучше любых других существующих аналогов справляется с задачей повышения адгезии, укрепления рыхлых материалов, предотвращение развития грибков и плесени.

Грунтовка глубокого проникновения, в чём её особенности

Для чего применяется данный вид грунтовки:

Улучшение гидроизоляции для мест с повышенной влажностью;
Подготовка поверхности для чистовой декоративной отделки.

Первый шаг – изучение инструкции, приложенной к любому товару. Производитель всегда указывает, предназначен состав для выполнения внутренних или наружных работ. Выбор будет зависеть от того, с какой целью совершаются те или иные действия.

Самих целей и задач бывает несколько:

Проведение чистовой отделки;
Укрепление оснований.

Первоначальная отделка сильно влияет на то, какая подбирается глубокопроникающая грунтовка.

Сфера применения грунтовки глубокого проникновения

В зависимости от конкретного состава компоненты в этих веществах могут отличаться друг от друга. Но некоторые свойства остаются актуальными для составов любых видов. Например, содержание летучих веществ в пределах 12-20% от общего объёма. Разбавитель или вода обычно составляют большую часть.

Грунтовка проникающая нужна, когда обрабатывают такие поверхности:

Известковая побелка, перед поклейкой обоев в дальнейшем. С первоначальной отделкой взаимодействуют акриловые смолы, входящие в состав этого материала. В результате создаётся прочная основа, которой не страшны влага и повреждения механического характера;
С первоначальной отделкой взаимодействуют акриловые смолы, входящие в состав этого материала.
Кирпичная кладка, которую подвергают окраске. При грунтовке швы не будут выкрашиваться, пыль оседает на поверхности с меньшей вероятностью;
При грунтовке швы не будут выкрашиваться, пыль оседает на поверхности с меньшей вероятностью.
Цементная штукатурка, на которую потом наносят шпатлёвку или краску. При наличии грунтового слоя основа точно не будет осыпаться. Расход краски снижается за счёт того, что меньше будут впитывающие характеристики материала. Можно будет не волноваться о мелких абразивных частицах, попадающих внутрь. Какая грунтовка лучше, решает сам покупатель.
При наличии грунтового слоя основа точно не будет осыпаться.

Грунтовка глубокого проникновения, как работает

Глубокое проникновение внутрь пор любого материала гарантировано, тем более – в случае с основами из акриловых смол. Полимеры в составе увеличивают так называемый капиллярный эффект. Когда влага испарилась, происходит склеивание небольших смоляных частиц друг с другом. Появляются длинные нити, которые скрепляют материал и служат своеобразным каркасом.

Глубокое проникновение внутрь пор любого материала гарантировано, тем более – в случае с основами из акриловых смол.

Выбор грунтовки глубокого проникновения

Любую грунтовку относят к строительным смесям в форме жидкости. Она нужна, чтобы подготовить основание для нанесения дополнительного слоя отделки в дальнейшем. Не важно, становится следующий слой промежуточным, или основным. Главное – выбрать конкретные составы, которые решают те или иные задачи. Это касается и грунтовок акриловых глубокого проникновения.

Грунтовка нужна, чтобы подготовить основание для нанесения дополнительного слоя отделки в дальнейшем.

По составу

Сохнут почти все разновидности достаточно быстро – до 5 часов и меньше. Поэтому подходят для работ, требующих выполнения в сжатые сроки. Достаточно просто нанести состав на поверхность, чтобы улучшить адгезию.

Выделяют такие разновидности в зависимости от состава:

Кварцевые;
Фосфатные;
Глифталевые;
Алкидные;
Минеральные;
Акриловые, в том числе – высококонцентрированный.

Могут присутствовать и дополнительные вещества, улучшающие те или иные свойства состава. Они расширяют сферу применения и увеличивают продолжительность общего срока эксплуатации. Сейчас редко какая компания выпускает однокомпонентные виды грунтовок глубокого проникновения.

Вот примеры добавок:

Силикон, для лучшей водоустойчивости;
Латекс, способствующей лучшей сцепляемости поверхностей с небольшими объёмами. Малопористые материалы после применения латекса тоже становятся более удобными в работе;
Фунгициды, играющие роль антисептиков. Благодаря этому антисептические свойства основы становятся лучше. Если поверхность эксплуатируется в условиях повышенной влажности, характеристика особенно актуальна.

Сохнут почти все разновидности достаточно быстро – до 5 часов и меньше.

По месту применения

Эксплуатационные условия способствуют расходу материалов в пределах 100-200 грамм на м2. Но даже у одного и того же грунта способности впитывать влагу разные. А места применения бывают различными:

Внешняя работа. Здесь актуальны морозостойкие грунтовки с глубоким проникновением. При низких температурах они не способствуют образованию трещин, отслаиванию других материалов. Силикат и акрил – самые распространённые основы для применения в этом случае;
Силикат и акрил – самые распространённые основы для применения снаружи здания.
Работы внутри. Грунты отличаются отсутствием запаха. Акриловые, алкидные или латексные разновидности лучше всего подходят для такой обработки. Антисептические характеристики актуальны при обработке внутри помещений, где постоянно сохраняется высокий уровень влажности;
Антисептические характеристики актуальны при обработке внутри помещений, где постоянно сохраняется высокий уровень влажности.
Бетонные полы. Для такой поверхности выпускают универсальные и специализированные составы. Сложно сразу определить, какие лучшие грунтовки выпускаются в этом плане.
Для полов выпускают универсальные и специализированные составы.

Особенности обработки поверхностей грунтовкой глубокого проникновения

Форма продажи большинства видов грунтовок – готовая к применения смесь, либо сухой порошок. В последнем случае особенно важно изучить инструкцию по применению, которая прикладывается к продукту. Чаще всего соотношение с водой стандартное – 1:1. При работе обязательно соблюдают меру личной безопасности. Сколько активных веществ применяется, зависит от производителя.

Чаще всего соотношение с водой стандартное – 1:1.

Норма расхода

Расход для этого материала нельзя назвать постоянной величиной. При составлении строительных смет чаще всего опираются на средние показатели, согласно сложившейся статистике. При правильной вентиляции и теплоизоляции расход становится меньше.

К таким свойствам грунтовки рекомендуют присматриваться покупателям:

Разновидность стройматериалов;
Рекомендации со стороны производителя;
Необходимое количество слоёв;
Техника нанесения;
Тип поверхности, проходящей обработку.

Обычно называют цифры от 80 до 600 грамм на квадратный метр, в зависимости от материала в основании и характеристик этой части. Сохнуть составы будут примерно одинаковое время.

При правильной вентиляции и теплоизоляции расход становится меньше.

Процедура нанесения

Правила нанесения остаются примерно одинаковыми для грунтов разных видов. Главное – проследить за тем, чтобы основание было чистым и сухим. Значит, остаточная влажность не должна превышать 3-5%. Масляные и грязевые следы, отслаивающиеся материалы должны отсутствовать, иначе потолок и другие поверхности пострадают. В описании производитель пишет, какой должна быть и минимальная температура поверхности.

Для распределения по поверхности применяют различные материалы:

Краскопульты;
Валики;
Пульверизаторы.

В некоторых случаях присутствует специальный пигмент, упрощающий контроль всего процесса. Он не влияет на способность укреплять основания.

Главное – проследить за тем, чтобы основание было чистым и сухим.

Изготовление грунтовки глубокого проникновения своими руками

Строительные составы с указанными характеристиками не обязательно приобретать в строительных магазинах. Можно сделать всё своими руками. С этой работой справится любой домашний мастер. Главное – соблюдать пропорции.

Список необходимых ингредиентов выглядит следующим образом:

2 части хозяйственного мыла на 60%;
5 частей костного столярного клея;
1 часть медного купороса.

Для приготовления берут кастрюлю или ведро с эмалью. Для еды потом использовать ту же ёмкость запрещается, универсальный тип посуды в этом плане отсутствует.

Обычный миксер или погружной блендер лучше приготовить заранее. Они помогут избавиться от комочков, которые могут образоваться в процессе работы. Важно защититься от поломок в такой технике. Сам процесс выглядит следующим образом:

В ёмкость наливают холодную воду, доводят до кипения.
Измельчают, либо натирают на кухонной тёрке хозяйственное мыло.
Полученную смесь добавляют в ёмкость, потом огонь ставят на минимальный уровень. Деревянную палку или лопатку используют для размешивания составов на протяжении некоторого времени.
Медный купорос и столярный клей присоединяются к раствору.
Ёмкость накрывается крышкой. На полчаса всё оставляют вариться, с использованием маленького огня. Периодически важно помешивать состав, тогда проще избежать комочков.
Через полчаса раствор снимают с огня, процеживают.
После остывания стена без проблем покрывается составом.

Часто в качестве основы применяют клей ПВА, он тоже подходит при такой работе. Простота и удобство – главные преимущества, характерные для такого способа приготовления. Технический регламент это подтверждает.

Простота и удобство – главные преимущества, характерные для такого способа приготовления.

Остатки смесей удаляются с трудом, поэтому о защите мебели рекомендуется позаботиться до начала работ. Грунтовки глубокого применения в большинстве своём предполагают применение акриловых смол в качестве основы. Качество разных видов продукции примерно одинаковое, зато отечественные разработки обходятся дешевле.

Видео: Все, что нужно знать о грунтах

Виды грунтовок для стен, потолков, пола и других поверхностей

Современный качественный ремонт сложно представить без использования грунтовок, предназначенных для улучшения свойств основания, выделенного под отделку. Виды грунтовок для стен исчисляются более чем 25-ю вариантами составов, различаемых по компонентам, механизму действия, характеристикам основания.

Свойства и характеристики грунтов

Грунтовка для стен, потолков, полов и других оснований – состав, наносимый на отделываемую поверхность с целью повышения ее эксплуатационных качеств. Структурно состав грунтовки включает в себя:

Пленкообразователи – смолы различного происхождения (акриловые, латексные и т.п.), масла, синтетические полимеры, клеящие вещества и битумы;
Пластифицирующие и модифицирующие добавки;
Ускорители отвердевания;
Пигменты.

Нанесение грунта обеспечивает:

закрепление основания путем предотвращения его осыпания или меления;
придание основанию большей прочности;
улучшение адгезии с последующим слоем отделки;
равномерность наложения штукатурных, шпаклевочных составов, ЛКМ или обойного клея.
экономию материалов, используемых для финишной отделки за счет урегулирования пористости и впитываемости поверхности
предотвращение образования грибковых культур;
повышение влагостойкости;
защиту от коррозии, что обеспечивают специальные грунты, в частности грунт по ржавчине или антикоррозийный грунт;
увеличение общего эксплуатационного срока декоративного материала.

Виды грунтовок для стен по их предназначению

Грунтовка виды и характеристики имеет достаточно многочисленные, поэтому градация будет осуществляться по функциональным группам.

Для начала стоит отметить, что все виды грунтовок для стен и других поверхностей выпускаются в виде:

Сухой смеси в виде порошка, требующего предварительного разведения с водой. Смесь фасуется в пакеты и мешки.
Готовых к применению масс (смеси пастообразной или жидкой консистенции). Форма выпуска – ведра, канистры или другая пластиковая тара.

Каждому составу грунта свойственно отличаться своим механизмом действия, что и послужило поводом для подразделения жидкостей на отдельные виды:

Грунтовка глубокого проникновения

Ее предназначение – максимальная пропитка глубинных слоев основания. За счет укрепляющего действия такой состав грунтовки значительно снижает расход шпатлевки или краски в результате снижения впитывающей способности плоскости.

Сфера применения – непрочные и старые основания, пористые поверхности, рыхлые и хорошо впитывающие стены (гипсокартон, гипсоволокно, оштукатуренные и ошпаклеванные поверхности).

Очень часто грунтовка глубокого проникновения содержит в составе антисептические компоненты, превращая жидкость в многофункциональный состав.

Адгезионная (бетоноконтакт)

За счет содержания мелкофракционного песка или цементирующих добавок, бетоноконтакт превращает гладкую поверхность в шероховатую, что значительно улучшает ее сцепление с отделкой.

Грунтовка адгезионная рекомендована к применению на твердых, гладких и слабо впитывающих плоскостях, таких как: стекло, гипсокартон, ранее окрашенные, стеклянные, кафельные, стальные или пластиковые основания.

Антигрибковая грунтовка для стен

Нанесение состава с противогрибковыми добавками предотвращает образование спор плесени и грибка. Его применение целесообразно для поверхностей, расположенных во влажных и недостаточно вентилируемых помещениях.

Также грунт может быть использован для комнат с избытком углекислого газа, приводящего к повышению влажности. Антигрибковая грунтовка для стен нашла свое применение в ванных, кухнях и подпольных помещениях. Обработке также подлежат излишне впитывающие и рыхлые поверхности.

Грунтовка универсальная

Самая популярная разновидность. Сочетает в себе несколько качеств, чем и обусловлен спрос на нее. Состав комбинирует в себе пропитывающие, изолирующие и адгезирующие свойства.

При этом грунтовка универсальная укрепляет поверхность и создает на ней паропроницаемую и водоупорную пленку.

Гидроизоляционная

Разновидность изолирующих грунтов. Используется для защиты отделки от возможной влаги, выделяемой внутренними слоями основания, то есть остаточной влаги. Жидкость паропроницаема, что не ограничивает сферу ее применения.

Гидроизоляционная грунтовка уместна для нанесения и на чрезмерно влажные, и на пористые поверхности, в частности бетонные, асбестоцементные, кирпичные гипсокартонные, шиферные и оштукатуренные. Также она отлично совместима с битумными, железобетонными, полимерными и металлическими плоскостями.

Антикоррозийный грунт

Применяется для первичной обработки металлических оснований. Уникальный состав способствует образованию пленки, уберегающей поверхность от внешних воздействий. Грунт по ржавчине делает металл влагостойким, что и предотвращает коррозию.

Изолирующие грунтовки

Обеспечивают образование тончайшей паропроницаемой пленки, основная цель которой – изолировать финишный отделочный слой от поверхности. Например, состав может быть использован как своеобразный барьер между старым слоем краски и новым.

Изолирующие грунтовки делают любое основание гладким. Кроме того, такие грунты помогут замаскировать масляные, ржавые или никотиновые пятна.

Специальные

Их назначение – укрепление и снижение расхода отделочных материалов. Помимо этого, они придают плоскости прочность и механическую стойкость, в том числе и температуроустойчивость.

Грунтовки специального назначения характеризуются самыми различными компонентами в составе. К специальной относятся и такая грунтовка, как: перхлорвиниловая, поливинилацетатная грунтовка (клеевая), полистирольная и др.

В отдельные группы выделяются грунты-краски и грунты-лаки. Первые играют роль защитников пористых, металлических и деревянных поверхностей. Они используются для отделочных, тепло- и гидроизоляционных целей.

Также грунт-краска повышает влагостойкость основания, препятствует ржавлению металла и подчеркивает благородную фактуру древесных основ. Вторые же применяются для пропитки дерева, в результате чего делают его более влагостойким и устойчивым к воздействию чистящих средств.

Виды грунтовок для стен по обрабатываемому основанию

Грунтовка, виды и характеристики которой были представлены, исходя из сферы ее применения и состава, также классифицируется по основанию, предназначенному для последующей обработки.

Грунтовка для минеральных оснований

В эту категорию можно отнести бетон, штукатурку, кирпич, шпаклевку, гипс, газобетон, камень и пр.

Основная цель грунта – увеличить прочность, адгезию и снизить пористость и впитываемость поверхности, а также наделить поверхность влагостойкостью и устойчивостью к различным воздействиям. Очень часто грунтовка для минеральных оснований содержит антигрибковые добавки.

Для дерева

Используется не только для улучшения сцепления и повышения прочностных характеристик, но и для защиты древесного основания от вредителей, грибка и гниения. То есть грунтовка для дерева обладает еще и антибактериальным действием. Наряду с этим она снижает расход краски или шпаклевки.

Грунт по металлу

Предназначен для замедления коррозии металлических поверхностей, в частности цинковых, чугунных, медных, стальных, алюминиевых, никелированных с основой из железа и др. Грунт по металлу создает влаго- и воздухонепроницаемый барьер, значительно увеличивает срок службы.

Грунт для стекла, пластмасс и других невпитывающих влагу поверхностей

Его основная цель – придание поверхности шероховатости для снижения вероятности отслоения последующих слоев отделки. Грунт для стекла может быть использован для обработки и других типов стен, однако это уже будет финансово нерентабельно.

Зная виды грунтовок для стен и сферу их использования, можно достаточно просто найти необходимый состав, как нельзя лучше подходящий и для типа отделываемого материала, и для определенных условий эксплуатации. Правильно подобранный грунт станет залогом долговечности и эстетичности финишной отделки.

Виды грунтовок для стен, видео

Противогрибковые грунтовки для ванной: подборка лучших

Разновидности фунгицидных средств

Большинство противогрибковых средств для стен содержат фунгициды – вещества биологического или химического происхождения, подавляющие развитие грибков. Активные компоненты добавляются в разные строительные составы и смеси для защиты конструктивных элементов от плесени.

Исходя из назначения выделяют две группы препаратов:

Эмульсии для профилактики. Первая группа антисептиков применяется при выполнении ремонтных работ – до отделки стен финишным покрытием. Антигрибковые грунтовки укрепляют основание, повышают адгезию, снижают пористость материала, убирают плесень и препятствуют дальнейшему развитию грибка.

Определяющим фактором выбора грунтовки с антисептиком против грибков и плесени служит тип обрабатывающего покрытия:

Концентраты для удаления плесени. Средства для обработки поверхностей, пораженных грибком. Составы проникают в структуру материала и уничтожают грибки, плесень, лишайники и мхи. Многие концентрированные препараты обладают длительным действием и предупреждают повторное заражение.

Эмульсии для профилактики и удаления грибковых образований разрабатываются на основе разных связующих компонентов:

1. Латексные – в составе отсутствуют соли тяжелых металлов, поэтому средство рекомендовано для обработки стен в жилых комнатах. Дополнительный плюс – пропускание воздуха.

1. Акриловые – антисептические препараты применимы как внутри, так и снаружи помещения.

1. Алкидные – эмульсии часто используются для обработки деревянных оснований.

Форма выпуска грунтовок и концентратов – готовая к применению жидкость. В целях профилактики грибковых образований концентрированную эмульсию можно развести водой.

Противогрибковые герметики для ванной

Без качественного герметика против плесени не обойтись, если старая замазка для швов почернела, на ней появились пятна, полосы темного цвета. Для ванной комнаты выпускаются герметики на основе силикона и акрила, а также комбинированные составы.

Силиконовые герметики

Такие средства являются самыми популярными для герметизации швов в санузле. Они выпускаются в двух вариациях – нейтральные и кислотные. Нейтральные герметики обладают химической стабильностью, не участвуют в реакциях с материалами, атмосферой комнаты. Они отличаются высокой эластичностью, растягиваются благодаря гибкости, которую дает им каучук в составе. Большинство нейтральных герметиков содержат фунг

границ | Потенциальный противогрибковый эффект хитозана против Candida albicans опосредуется ингибированием экспрессии компонентов комплекса SAGA и последующим изменением целостности клеточной поверхности

Введение

Из-за увеличения старения населения и медицинских достижений в лечении пациентов с ослабленным иммунитетом резко возросла частота инвазивных грибковых инфекций (Cassone and Cauda, 2012; Dall et al., 2013; Papon et al., 2013). Среди них Candida albicans является наиболее распространенной причиной грибковых инфекций у людей. C. albicans — это комменсальный организм, населяющий несколько участков у человека (Martin, 1999; Pappas et al., 2004; Weiner et al., 2016). Однако C. albicans может стать патогенным (Cassone and Cauda, 2012; Papon et al., 2013), и инфекции возникают в основном у пациентов с ослабленным иммунитетом (Papon et al., 2013; Kullberg and Arendrup, 2015). Без надлежащего лечения может возникнуть опасный для жизни сепсис, вызванный инфекцией C. albicans , с общим уровнем смертности до 50% (Delaloye and Calandra, 2014).

В настоящее время клиническое лечение грибковых инфекций в основном зависит от четырех классов лекарств (аналогов нуклеозидов, азолов, эхинокандинов и полиенов) (Robbins et al., 2016). Вместе ограниченный выбор и растущее глобальное использование противогрибковых препаратов потенциально могут привести к повышению устойчивости. В течение последних двух десятилетий во всем мире резко возросло количество патогенов человека, вызывающих грибковые заболевания (Bertagnolio et al., 2004; Wisplinghoff et al., 2004; Yang et al., 2010), что привело к снижению эффективности лечения грибковых заболеваний. инфекция (Martin, 1999; Angiolella et al., 2008; Chang et al., 2013; Ford et al., 2015). Таким образом, необходимо разработать новые многообещающие терапевтические стратегии или новые противогрибковые средства (Brown et al., 2012; Roemer and Krysan, 2014).

Хитозан [поли- (β-1 → 4) -2-амино-2-дезокси- D -глюкопираноза] представляет собой природный, биоразлагаемый и нетоксичный линейный полисахарид, полученный из деацетилированного хитина (Kong et al., 2010 ; Cheung et al., 2015). Хитозан широко используется во многих биомедицинских и сельскохозяйственных применениях, а также в пищевой, водоочистной и косметической промышленности (Shahidi et al., 1999; Кумар, 2000; Haque et al., 2005; Ким и др., 2005; Ямада и др., 2005; Адзума и др., 2015; Cheung et al., 2015). Кроме того, сообщалось, что хитозан обладает антимикробным действием широкого спектра действия против грамположительных бактерий, грамотрицательных бактерий и грибов (Kendra and Hadwiger, 1984; Hirano, Nagao, 1989; Тихонов и др., 2006; Pena et al., 2013; Cheung et al., 2015). В нескольких обзорных статьях показано, что уровни антимикробной активности хитозана тесно связаны со степенью его деацетилирования и pH (Kong et al., 2010; Cheung et al., 2015; Хоссейннеджад и Джафари, 2016). В частности, более высокая степень деацетилирования увеличивает антимикробную активность хитозана. Кроме того, противогрибковые и противомикробные эффекты хитозана зависят от pH; более высокая антимикробная активность наблюдается при более низких значениях pH. Было высказано предположение, что хитозан обладает антимикробной активностью в качестве катионного полимера при pH ниже 6,5 (Lim and Hudson, 2003; Rabea et al., 2003; Pena et al., 2013). Следовательно, положительно заряженный хитозан может взаимодействовать с отрицательно заряженной поверхностью микробных клеток и нарушать анионно-катионный баланс, тем самым оказывая ингибирующий эффект (Martinez-Camacho et al., 2010). Таким образом, антимикробная активность хитозана во многом зависит от его свойств и от типа участвующих бактерий или грибов (Kong et al., 2010; Cheung et al., 2015; Hosseinnejad and Jafari, 2016).

Биоцидное действие хитозана против микроорганизмов демонстрирует большой коммерческий потенциал, но механизмы, лежащие в основе этого противомикробного действия, остаются в значительной степени неизвестными. Результаты предыдущего исследования, в котором анализировалось профилирование массива реакции Staphylococcus simulans и Staphylococcus aureus на хитозан, предполагают, что антибактериальная активность хитозана, возможно, связана с его связыванием с поверхностью клетки, что приводит к вмешательству бактериальный энергетический метаболизм и цепь переноса электронов (Raafat et al., 2008). Кроме того, было выполнено генетическое профилирование обработанного хитозаном Saccharomyces cerevisiae , и сообщалось, что лечение хитозаном привело к трем основным транскрипционным ответам (Zakrzewska et al., 2005). В этих ответах участвует фактор стрессовой реакции Cin5p; Crz1p, который участвует в пути кальциневрина; и фактор транскрипции Rlm1p, который необходим для целостности клеточной стенки (Zakrzewska et al., 2005). Более того, обработанный хитозаном S. cerevisiae был более устойчив к ферменту, разрушающему клеточную стенку (CWDE) β-1,3-глюканазе, что позволяет предположить, что хитозан может быть соединением, нарушающим плазматическую мембрану (Zakrzewska et al., 2005). Эти исследования на бактериях и почкующихся дрожжах показали, что поддержание функциональной клеточной мембраны и клеточной поверхности важно для толерантности к хитозану.

В этом исследовании мы впервые идентифицировали 38 регуляторов транскрипции и 11 генов, связанных с клеточной стенкой, участвующих в устойчивости к хитозану, посредством скрининга мутантных библиотек. Среди этих генов ADA2 и CRZ1 были выбраны для дальнейшего анализа, поскольку ada2 Δ продемонстрировал самую низкую оптическую плотность при скрининге мутантной библиотеки и отвечает за целостность клеточной стенки (Bruno et al., 2006; Sellam et al., 2009) и поскольку было показано, что CRZ1 в почкующихся дрожжах необходим для устойчивости к хитозану (Zakrzewska et al., 2005). Однако, хотя было показано, что crz1 Δ в SC5314 является высокочувствительным к хитозану (неопубликованные данные), экспрессия CRZ1 не показала значительного изменения в ответ на хитозан. Таким образом, эта работа в основном фокусируется на роли Ada2 в C. albicans в ответ на хитозан.

Ген ADA2 ( a lteration / d эффективность в a активации 2 ) ген был впервые идентифицирован в S.cerevisiae (Бергер и др., 1992). ADA2 является компонентом комплекса цетилтрансферазы (SAGA) S pt- A da- G cn5- , который играет важную роль в ацетилировании гистонов и участвует в регуляции множества генов ( Wang et al., 1998; Daniel and Grant, 2007). Возможности факторов комплекса SAGA для ацетилирования гистонов и взаимодействия с кислыми активационными доменами были широко изучены, и основная субъединица комплекса SAGA Gcn5-Ada2-Ada3 требуется для катализирования ацетилирования нуклеосом (Marcus et al., 1994; Белоцерковская и др., 2000; Баласубраманян и др., 2002; Бейкер и Грант, 2007). Gcn5 проявляет активность гистонацетилтрансферазы (HAT) и может ацетилировать N-концевые лизины на гистонах. Кроме того, для процесса ацетилирования гистонов на нуклеосомах необходимы Ada3 (Ngg1) и Ada2 (Marcus et al., 1994; Balasubramanian et al., 2002). Нулевые мутации в любом компоненте комплекса SAGA приводят к медленному росту и снижению устойчивости к стрессу окружающей среды (Berger et al., 1992). Напр., Делеция ADA2 может приводить к нестабильности комплекса SAGA, приводя к снижению ацетилирования гистонов и развитию фенотипа чувствительности к стрессу (Daniel and Grant, 2007).

C. albicans содержит гомологи с высокой степенью сходства компонентов комплекса S. cerevisiae SAGA (Sellam et al., 2009; Chang et al., 2015). Ген ADA2 также играет важную роль в ацетилировании гистонов у C. albicans ; ADA2 делеционные штаммы показали пониженное ацетилирование h4K9 (Sellam et al., 2009). Анализ иммунопреципитации хроматина (ChIP) дополнительно подтвердил, что Ada2 задействован и может связываться с 200 промоторами генов, и что Ada2 участвует в опосредовании экспрессии многочисленных генов, включая гены, связанные с гликолизом, метаболизмом пирувата, окислительным стрессом, реакциями на лекарства и клеточной стенкой. ответы (Sellam et al., 2009). В частности, реакция на стресс клеточной стенки, опосредованная Rlm1, Ada2 и Cas5, предположительно необходима для целостности клеточной стенки (Bruno et al., 2006; Sellam et al., 2009). Кроме того, защитные эффекты систем оттока АТФ-связывающей кассеты ( ABC ) и главного фасилитатора ( MFS ), напрямую регулируемые Ada2, необходимы для толерантности к противогрибковым препаратам (Sanglard et al., 2009; Ramirez-Zavala et al. др., 2014).

Многие исследования показали, что противомикробный эффект хитозана нацелен на клеточную поверхность, что позволяет предположить, что хитозан является хорошей альтернативой противогрибковой терапии (Kong et al., 2010; Pena et al., 2013; Cheung et al., 2015; Хоссейннеджад и Джафари, 2016). Понимание основных механизмов будет чрезвычайно полезным и позволит нам более конкретно применить это понимание к клиническому лечению грибковых инфекций. В этой работе мы обнаружили, что ada2 Δ-клеток были высокочувствительны к хитозану. Убедительное доказательство того, что Ada2 принимает непосредственное участие в составе и целостности клеточной поверхности, было обнаружено с помощью просвечивающей электронной микроскопии (ТЕМ). Кроме того, вместо того, чтобы индуцироваться, экспрессия ADA2, GCN5 и нескольких Ada2-опосредованных генов, связанных с клеточной стенкой, значительно подавлялась при заражении хитозаном.В совокупности эти данные указывают на то, что потенциальный противогрибковый механизм хитозана действует путем противодействия экспрессии гена комплекса SAGA, тем самым изменяя целостность клеточной поверхности C. albicans .

Материалы и методы

Среда и условия роста

Если не указано иное, все химические вещества, использованные в этом исследовании, были приобретены у Sigma-Aldrich Corporation (Сент-Луис, Миссури, США). Среду Лурия-Бертани (LB) и среду дрожжевой экстракт-пептон-декстроза (YPD) готовили, как описано ранее (Liang et al., 2014). Агар YPD с добавлением 0,2 мг / мл нурсеотрицина (NAT, Werner BioAgents, Йена, Германия) использовали для отбора и поддержания устойчивых к NAT штаммов C. albicans . Кривые роста измеряли с помощью плотномера Biowave, как описано ранее (Deng and Lin, 2018). Агар YPD с добавлением 0,04% SDS использовали в анализе точечного разведения. Жидкую среду RPMI1640 готовили из 0,165 М морфолинпропансульфоновой кислоты (MOPS) и 2% глюкозы и доводили до pH 7,0 для среды контрольной группы, как описано ранее (Alburquenque et al., 2010; Chien et al., 2013). Среду для контрольной группы с буфером готовили из среды RPMI 1640 с добавлением 0,2% уксусной кислоты с конечным pH 6,3. Хитозановую среду готовили из RPMI 1640 с добавлением 0,2% хитозана, растворенного в 0,2% уксусной кислоте (экспериментальная группа). Хитозан, использованный в этом исследовании, был приобретен у Shin Era Technology (Тайбэй, Тайвань). Молекулярная масса хитозана составляет примерно 23 кДа (20–30 кДа), а степень деацетилирования хитозана составляет примерно 94% (Tsai et al., 2011; Chien et al., 2013). Для приготовления агара RPMI 1640 из 0,3 M MOPS и 4% глюкозы готовили среду RPMI 1640 двойной концентрации. После стерилизации через мембранный фильтр 0,22 мкм (GeneDireX, Лас-Вегас, Невада, США) двойную концентрацию среды RPMI 1640 смешивали с равным объемом стерилизованного 3% агара. Среду RPMI 1640 с добавлением конечной концентрации 0,2% уксусной кислоты или 0,2% хитозана смешивали со стерилизованным агаром.

Скрининг библиотеки мутантов

Модель C.albicans мутантная библиотека, полученная из BWP17, была куплена на сайте FGSC (Davis et al., 2002; Nobile and Mitchell, 2005; Richard et al., 2005; Norice et al., 2007; Rauceo et al., 2008). Чтобы получить относительно оптимальные условия для скрининга, были протестированы три различных концентрации (0,1%, 0,2% и 0,5%) хитозана, растворенного в 0,1%, 0,2% и 0,5% уксусной кислоте, соответственно. Штамм C. albicans дикого типа сначала культивировали в RPMI, буферном контроле или RPMI + хитозан в течение 24 или 48 часов и наносили пятна на чашки YPD, не содержащие хитозана, после двукратной промывки PBS (дополнительная фигура S1).Каждый фактор транскрипции C. albicans и мутантный штамм клеточной поверхности выращивали отдельно в жидкой среде YPD в 96-луночных микропланшетах при 30 ° C в течение ночи. Затем штаммы переносили в 96-луночные микропланшеты, содержащие жидкую среду RPMI 1640 (с добавлением 0,165 M MOPS и 2% глюкозы). Контрольную группу буфера в скрининге мутантной библиотеки получали из среды RPMI 1640 с добавлением 0,5% уксусной кислоты. Хитозановую среду получали из RPMI 1640 с добавлением 0,5% хитозана, растворенного в 0.5% уксусная кислота (экспериментальная среда). Микропланшеты инкубировали при 30 ° C в течение 48 ч, а затем измеряли оптическую плотность при 600 нм в считывающем устройстве для микропланшетов SpectraMax 190 (Molecular Devices, Сан-Хосе, Калифорния, США). Значение поглощения для каждого мутанта, обработанного хитозаном или уксусной кислотой, сравнивали для определения чувствительности штаммов к хитозану, и статистическую значимость определяли с помощью теста Стьюдента t .

Конструкция плазмиды и штамма

Модель C.albicans и праймеры, использованные в этом исследовании, перечислены и описаны в дополнительных таблицах S1, S2, соответственно. Для удаления гена ADA2 были выполнены два цикла ПЦР. 5′- и 3′-фланкирующие области ADA2 амплифицировали с использованием наборов праймеров 1021/1022 и 1147/1148, соответственно. Эти продукты ПЦР расщепляли Apa I / Xho I и Not I / Sac Π, соответственно, и вставляли в плазмиду pSFS2A (Reuss et al., 2004) для создания плазмиды pSFS- ADA2 KO. Эту конструкцию линеаризовали перевариванием Apa I / Sac II и трансформировали в штамм SC5314 (YL2) для получения гетерозиготных штаммов ada2Δ / ADA2 . Маркер SAT1 был переработан путем обработки 2% мальтозы. Гетерозиготные штаммы были ретрансформированы той же конструкцией с делецией для получения штаммов ada2 Δ (YL1693 и YL1694). Мутанты были проверены с помощью наборов праймеров 1019/1020, 6/1017 и 7/1018 (дополнительная фигура S2).Для создания штаммов, дополненных ADA2 , кодирующая область гена ADA2 и ~ 1,5 т.п.н. вышележащих последовательностей, полученных из http://www.candidagenome.org/, амплифицировали из генома SC5314 с помощью ПЦР с набором праймеров 1149 / 1150. Затем продукты ПЦР расщепляли Kpn I / Apa I и вставляли в плазмиду pSFS2A для получения плазмиды pSFS- ADA2 AB. Эти конструкции были линеаризованы путем переваривания BmgB I и трансформированы в ada2 Δ для получения штаммов ada2Δ :: ADA2 (YL1687 и YL1689).Штаммы, дополненные ADA2 , были подтверждены с помощью набора праймеров 1019/1020. Для удаления GCN5 5′- и 3′-фланкирующие области GCN5 амплифицировали с использованием наборов праймеров 1251/1252 и 1253/1254, соответственно. Продукты ПЦР расщепляли Apa I / Xho I и Sac II / Sac I и клонировали в pSFS2A для получения pSFS-GCN5 KO. Затем эту плазмиду расщепляли Apa I / Sac I и трансформировали в штамм SC5314 для получения гетерозиготных штаммов gcn5Δ / GCN5 .Маркер SAT1 был переработан путем обработки 2% мальтозы. Гетерозиготные штаммы повторно трансформировали той же самой делеционной конструкцией, чтобы получить штаммы gcn5 Δ (YL1789 и YL1790). Праймеры 1255/1256, 6/1257 и 7/1258 использовали для верификации генотипа gcn5 Δ. Для конструирования функциональных штаммов GCN5, дополненных , кодирующая область GCN5 и ~ 0,7 т.п.н. вышележащих последовательностей амплифицировали с использованием набора праймеров 1347/1348. Продукты ПЦР гидролизовали Apa I / Xho I и вставляли в плазмиду pSFS2A-GCN5 KO для получения плазмиды pSFS- GCN5 AB.Эти конструкции были линеаризованы с использованием Apa I / Sac I и трансформированы в штаммы gcn5 Δ для получения штаммов gcn5Δ :: GCN52 (YL1828 и YL1829). Комплементарные штаммы GCN5 были подтверждены с помощью набора праймеров 1255/1256.

Тесты чувствительности

Ночные культуры клеток C. albicans при OD ₆₀₀ 1,0 разводили 10-кратными серийными разведениями. Каждое разведение по 5 мкл (от 1 × 10 ⁸ до 1 × 10 ⁴ клеток) наносили на агар RPMI 1640, агар RPMI 1640, содержащий 0.2% уксусная кислота (буферная контрольная группа) или агар RPMI 1640 с добавлением 0,2% хитозана (экспериментальная группа). Для тестирования агентов, разрушающих клеточную стенку, были использованы конечные концентрации 60 мкМ калькофлуор уайт и 0,2 мкг / мл каспофунгина (Zakrzewska et al., 2005; Wang et al., 2011; Delgado-Silva et al., 2014). Тест на чувствительность клеточной мембраны проводили на агаре с конечной концентрацией 0,04% SDS (Wang et al., 2011). Планшеты инкубировали при 30 ° C в течение 2 дней, и были получены изображения.

Количественная полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией

Анализ проводился в соответствии с протоколом, установленным в нашей лаборатории (Chang et al., 2016). Всего 200 мкл клеток C. albicans , культивированных в течение ночи, переносили в 10 мл свежей жидкости YPD. Клетки собирали центрифугированием при 3000 об / мин в течение 10 мин и трижды промывали стерильной водой. Клетки каждого образца обрабатывали средой RPMI 1640, средой RPMI 1640, содержащей 0,2% уксусной кислоты (буферная контрольная группа), или средой RPMI 1640 с добавлением 0,2% хитозана (экспериментальная группа) при 30 ° C в течение 20 мин. Клетки собирали центрифугированием при 3000 об / мин в течение 10 мин и трижды промывали стерильной водой.Тотальную РНК экстрагировали из клеток с использованием набора для очистки дрожжевой РНК MasterPure ^TM (Epicenter, Madison, WI, США), а ДНК удаляли с помощью ДНКазы I (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, США). РНК транскрибировали в комплементарную ДНК (кДНК) с помощью набора для синтеза кДНК iScript ^TM (Bio-Rad Laboratories., Inc., Геркулес, Калифорния, США). Количественную ПЦР проводили на приборе Bio-Rad CFX Manager (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, США). Каждый эксперимент независимо повторяли три раза, и показаны средние значения трех повторов.Различия между контрольной и экспериментальной группами анализировали с помощью критерия Стьюдента t . Наборы праймеров 541/542, 1085/1086, 1228/1229, 1234/1235, 1238/1239, 1087/1088,1089/1090, 1493/1494, 1558/1559 и 1560/1561 были использованы для обнаружения ACT1. , Выражения ADA2, ALS2, PGA45, ACE2, MDR1, CDR1 и GCN5 соответственно. Для статистического анализа использовался критерий Стьюдента t . Экспрессию целевых генов нормализовали до экспрессии гена ACT1 .Значения Cq гена ACT1 были стабильными в каждом биологическом эксперименте (дополнительная таблица S3).

Просвечивающая электронная микроскопия

Штаммы дикого типа и ada2 Δ, обработанные средой RPMI 1640, средой RPMI 1640, содержащей 0,2% уксусной кислоты, или средой RPMI 1640 с добавлением 0,2% хитозана при 30 ° C в течение 20 мин, трижды промывали стерильной водой. Промытые образцы фиксировали 2,5% глутаровым альдегидом при комнатной температуре в течение 80 мин, а затем промывали 0.1 М фосфатный буфер трижды по 15 мин. Затем образцы фиксировали 1% тетроксидом осмия (OsO ₄) при комнатной температуре в течение 1 часа и промывали 0,1 М фосфатным буфером трижды по 15 минут каждый. Затем образцы дегидратировали путем погружения в серию градуированного этанола (30%, 50%, 70%, 90% и 100%) на 15 мин и дополнительно дегидратировали погружением в 100% ацетон два раза по 30 мин каждый. Наконец, образцы обрабатывали с различными соотношениями 100% ацетон: смола Спурра в течение 4 часов и с чистой смолой Спурра (Electron Microscopy Science, Hatfield, PA, США) в течение ночи.Образцы залили чистой смолой Spurr при 70 ° C на 2 дня (Rico et al., 1991; Vazquez-Munoz et al., 2014). Блоки образцов разрезали на тонкие срезы с помощью ультрамикротома для получения срезов толщиной 50–70 нм и помещали на медную сетку для наблюдения с помощью ПЭМ. Для измерения толщины стенки клетки изображения были получены при увеличении 8000 ×, 30 000 × и 50 000 ×. Измерения толщины клеточной стенки в клеток C. albicans количественно оценивали с помощью программного обеспечения DigitalMicrograph.

Результаты

Скрининг библиотеки мутантов определил участие ADA2 в C. albicans Устойчивость к хитозану

Чтобы понять механизм действия хитозана против C. albicans , был проведен скрининг мутантной библиотеки. Всего было протестировано 337 штаммов мутантов фактора транскрипции и 186 штаммов мутантных генов, связанных с клеточной поверхностью, с обработкой хитозаном или без нее (дополнительная таблица S4). В общей сложности 38 мутантных штаммов генов фактора транскрипции и 11 мутантных штаммов генов, связанных с клеточной поверхностью, показали значительное снижение роста клеток после обработки хитозаном (рис. 1 и дополнительная таблица S4).Функциональный анализ этих потенциальных генов ответа на хитозан выявил различные функции, в том числе участие в образовании биопленок (17 генов), клеточной адгезии (8 генов), образовании гиф (5 генов), вирулентности (2 гена) и противогрибковых ответах (9 генов). ). Кроме того, функция 13 генов остается неясной (дополнительная таблица S4), хотя ORF19.2476, ORF19.2332 и ORF19.4981 были охарактеризованы как гены, связанные с клеточной стенкой в мутантной библиотеке (Davis et al., 2002; Нобиле и Митчелл, 2005; Ричард и др., 2005; Norice et al., 2007; Rauceo et al., 2008). Ada2 был выбран для дальнейшего исследования, потому что самая низкая оптическая плотность наблюдалась для мутанта ADA2 (рисунок 1 и дополнительная таблица S4).

Рис. 1. Результаты скрининга фактора транскрипции и нокаута гена, связанного с клеточной поверхностью, с обработкой хитозаном. Каждый мутантный штамм выращивали отдельно в жидкой среде RPMI 1640 (RPMI), RPMI, содержащей 0,5% уксусной кислоты (RPMI + буфер), или RPMI, содержащей оба 0.5% уксусная кислота и хитозан (RPMI + буфер + 0,5% хитозан) в 96-луночных микропланшетах. Микропланшеты инкубировали при 37 ° C в течение 48 ч, и оптическую плотность клеток измеряли при 600 нм. Оптическую плотность каждого мутантного штамма, обработанного хитозаном или уксусной кислотой, сравнивали для определения чувствительности штаммов к хитозану. Статистическую значимость определяли с помощью теста Стьюдента t (непарный, двусторонний). ^∗ P <0,05; ^∗∗ P <0.01.

Делеция гена ADA2 привела к высокой чувствительности к хитозану у C. albicans SC5314

Для дальнейшего подтверждения результатов скрининга из стандартного штамма C. albicans SC5314 были сконструированы ada2 Δ штаммов и дополнительные штаммы, которые были протестированы на чувствительность к хитозану. Как показано на рисунке 2A, штаммы ada2 Δ в контрольных группах RPMI и 0,2% уксусной кислоты проявляли слабый дефект роста, в то время как рост мутантов полностью прекращался на среде с добавлением 0.2% хитозан. Повторное введение функциональной копии ADA2 в штаммы ada2 Δ спасло устойчивость к хитозану. Эти результаты показывают, что ADA2 необходимо для адаптации C. albicans к хитозану. Кроме того, кривые роста штаммов дикого типа, ada2, Δ и комплементарных штаммов показали, что делеция ADA2 может вызывать умеренный дефект роста (рис. 2В).

Рисунок 2. C.albicans ada2 Δ штаммы были очень чувствительны к заражению хитозаном. (A) Делеция ADA2 приводила к умеренному дефекту роста в группах RPMI и буферного контроля (0,2% уксусная кислота) и полностью прекращала рост в 0,2% хитозане. У ревертантных штаммов сохранены рост и устойчивость к хитозану. (B) Ночные культуры клеток C. albicans разводили до OD ₆₀₀ 0,1 в свежей жидкой среде YPD. Скорость роста контролировали с помощью плотномера Biowave.Эксперименты проводили в трех биологических повторностях.

Хитозан повредил клеточную стенку и клеточную мембрану C. albicans , и этот эффект был усилен в клетках ada2 Δ

ТЕМ показал, что ни RPMI, ни RPMI, содержащие 0,2% уксусной кислоты, не вызывают очевидных эффектов на клетки дикого типа; в то время как клеточная поверхность ada2 Δ клеток была аберрантной в обоих условиях (рис. 3). Однако обработка 0,2% хитозаном в течение 20 мин приводила к нарушению целостности клеточной поверхности при температуре ° C.albicans SC5314 клеток, которые спорадически проявляли аберрантную морфологию (рис. 3). Морфология клеток ada2 Δ была еще более затронута; граница между клеточной стенкой и клеточной мембраной была неоднозначной, а структурная целостность клеточной стенки была неопределенной (Рисунок 3).

Рисунок 3. Обработка хитозаном нарушила целостность клеточной стенки и клеточной мембраны C. albicans , и этот эффект усилился в клетках ada2 Δ.Изображения были получены при увеличениях (A), 30 000 ×, (B) 50 000 × и (C), 8000 ×. Клетки штамма SC5314 дикого типа демонстрировали четко определенные границы либо в RPMI, либо в RPMI + 0,2% уксусной кислоты (буферная контрольная среда), но проявляли слегка нерегулярную морфологию клеток после обработки хитозаном. Делеция гена ADA2 привела к нечеткой поверхности клеток как в RPMI, так и в буферной контрольной группе, тогда как обработанные хитозаном клетки ada2 Δ демонстрировали коллапсирующую морфологию.Масштабные полосы 0,5 мкм, 0,2 мкм и 2 мкм показаны на репрезентативных изображениях, полученных при увеличении 30 000 ×, 50 000 × и 8 000 × соответственно.

Толщина клеточной стенки была уменьшена как в клетках ada2 Δ, так и в клетках SC5314, обработанных хитозаном

Неожиданно, даже без обработки хитозаном, штаммов с делецией ADA2 продемонстрировали чрезвычайно тонкую клеточную стенку (рис. 3С). Этот феномен также наблюдался у обработанного хитозаном штамма дикого типа (рис. 3С).Для определения толщины клеточной стенки были отобраны пять отдельных клеток дикого типа SC5314, ada2 Δ и обработанные хитозаном штаммы дикого типа. Для количественного определения толщины клеточной стенки были измерены тридцать участков по окружности каждой клетки (рис. 4А). Количественные результаты показали, что необработанный штамм дикого типа показал толщину клеточной стенки 0,125 мкм, измеренную между плазматической мембраной и клеточной стенкой, в то время как толщина клеточной стенки в штаммах ada2 Δ и обработанных хитозаном штаммах дикого типа была значительно ниже, в пределах от 0.04 до 0,06 мкм и от 0,06 до 0,07 мкм соответственно (рис. 4В). Эти данные предоставляют прямые доказательства, подтверждающие результаты нескольких предыдущих исследований (Bruno et al., 2006; Sellam et al., 2009), указывающих на то, что существование Ada2 контролирует реакцию на повреждение клеточной стенки. Кроме того, на основе этих результатов мы предположили, что потенциальный противогрибковый механизм хитозана против этого грибка действует путем противодействия экспрессии ADA2 , тем самым изменяя целостность поверхности клеток C. albicans .

Рис. 4. Толщина клеточной стенки была значительно уменьшена как у штамма ada2 Δ, так и у обработанного хитозаном штамма SC5314 дикого типа. (A) Пять отдельных клеток из изображений ПЭМ, полученных при 8000-кратном увеличении, были случайным образом выбраны, и толщина их клеточной стенки была измерена при 30-кратном увеличении с использованием программного обеспечения DigitalMicrograph. (B) Были измерены тридцать участков по окружности каждой выбранной ячейки. Толщина клеточной стенки ada2 Δ клеток была значительно ниже, чем у клеток SC5314 дикого типа.Обработанные хитозаном клетки SC5314 дикого типа показали статистически значимое уменьшение толщины клеточной стенки, сравнимое с тем, что наблюдается в клетках ada2 Δ. Значения представляют собой средние значения ± стандартное отклонение не менее трех экспериментальных повторов. ^∗∗∗ P <0,001 по сравнению со значением для необработанных клеток SC5314 дикого типа. Статистическую значимость определяли с использованием критерия Стьюдента t .

Более тонкая клеточная стенка ada2 Δ увеличивает восприимчивость к поверхностным стресс-индуцирующим агентам

Модель C.albicans Ada2 белок необходим для устойчивости к клеточным стрессорам, включая флуконазол, каспофунгин и окислительный стресс (Bruno et al., 2006; Sellam et al., 2009; Ramirez-Zavala et al., 2014). Поэтому для использования в анализах чувствительности были выбраны два агента, нарушающие клеточные стенки (калькофтор уайт и каспофунгин), и один агент, нарушающий клеточную мембрану (Roncero and Duran, 1985; Ram et al., 1994). Как показано на Фигуре 5A, по сравнению с ростом штаммов дикого типа, рост штаммов ada2 Δ полностью прекращался на среде с добавлением 60 мкМ calcofluor white, 0.2 мкг / мл каспофунгина или 0,04% SDS, тогда как эти стрессогенные факторы оказали лишь умеренное влияние на рост штамма дикого типа (рис. 5). Штаммы, дополненные ADA2 , восстановили устойчивость к этим агентам стресса клеточной поверхности (рис. 5).

Фигура 5. Клетки ada2 Δ были более чувствительны к агентам, разрушающим клеточную поверхность, чем клетки дикого типа. Рост ada2 Δ клеток был полностью прекращен в присутствии (A) агентов, разрушающих клеточную стенку, калькофлуор уайт и каспофунгин, и (B) агента, разрушающего клеточные мембраны, SDS.Штаммы SC5314 дикого типа и комплементарные штаммы демонстрировали сходный рост.

Хитозан ингибирует ADA2 Экспрессия гена

Клетки ada2 Δ и обработанные хитозаном клетки дикого типа показали идентичный фенотип с точки зрения их более тонких клеточных стенок (рис. 4). Это открытие означает, что хитозан или уксусная кислота вместо индукции экспрессии ADA2 могут репрессировать ADA2 . Чтобы понять влияние хитозана на экспрессию ADA2 , был проведен анализ количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР).Мы впервые продемонстрировали, что уксусная кислота не является экзогенным фактором, влияющим на экспрессию ADA2 ; не было обнаружено значительных различий в экспрессии ADA2 между клетками, культивируемыми в RPMI, и клетками, культивированными в растворе уксусной кислоты (рис. 6А). Однако экспрессия ADA2 была значительно снижена в штамме дикого типа после воздействия 0,2% хитозана в течение 20 минут и в течение 1 часа по сравнению с таковой в необработанных клетках C. albicans (Фигура 6В).

Рисунок 6. Хитозан, но не только RPMI или буферный контроль (уксусная кислота), подавлял экспрессию гена ADA2 . (A) Обработка 0,2% или 0,5% уксусной кислоты в течение 20 минут не оказала значительного влияния на экспрессию ADA , тогда как обработка (B) хитозаном клеток SC5314 в течение 20 минут или в течение 1 часа показала сходные тенденции к значительному снижению ADA2 Экспрессия гена . Значения представляют собой средние значения ± стандартное отклонение не менее трех экспериментальных повторов. ^∗ P <0.05 по сравнению со значением для необработанных клеток SC5314 дикого типа. ADA2 e -экспрессия была нормализована к экспрессии гена ACT1 , как указано. Статистическую значимость определяли с использованием критерия Стьюдента t .

Гены, связанные с клеточной стенкой, позитивно регулируемые Ada2, ингибируются хитозаном

Эксперимент с ChIP продемонстрировал, что многие гены, ассоциированные с клеточной стенкой, непосредственно регулируются с помощью Ada2 (Sellam et al., 2009). Из этой базы данных были выбраны три гена, а именно ALS2, PGA45 и ACE2 (Sellam et al., 2009). Als2 является предполагаемым GPI-якорем, который принадлежит к семейству ALS и играет роль в адгезии и формировании биопленок (Hoyer et al., 1998; Hoyer, 2001). PGA45 кодирует предполагаемый GPI-якорный белок клеточной стенки (De Groot et al., 2003). Ace 2 представляет собой фактор транскрипции клеточной стенки, который регулирует несколько генов, связанных с клеточной стенкой, таких как ASh2, PIR1, PRY2 и RME1 (Kelly et al., 2004). В качестве дополнительной поддержки результатов предыдущего исследования (Sellam et al., 2009), мы обнаружили, что экспрессия этих трех генов, в частности ALS2 и PGA45 , положительно регулируется с помощью Ada2; ADA2 делеция привела к значительному снижению экспрессии этих генов (фигура 7A). Произошло небольшое, но несущественное снижение экспрессии ACE2 (фиг. 7A). Кроме того, обработка штамма C. albicans дикого типа хитозаном привела к значительному снижению экспрессии ALS2, PGA45 и ACE2 (фигура 7B).Эти данные твердо подтверждают гипотезу о том, что молекулярный механизм хитозана действует путем ингибирования ADA2 в C. albicans , чтобы подавить экспрессию нескольких генов, связанных с поверхностью клетки, тем самым влияя на поверхность клетки и уменьшая толщину стенки клетки.

Фигура 7. Экспрессия генов, связанных с клеточной стенкой, положительно регулируется Ada2, но отрицательно регулируется хитозаном. (A) Экспрессия ALS2, PGA45 и ACE2 , в частности ALS2 и PGA45 , регулировалась Ada2; ADA2 делеция привела к значительному снижению экспрессии этих генов.Произошло очень небольшое, незначительное снижение экспрессии ACE2 . ^* P <0,05 по сравнению со значением для необработанных клеток SC5314 дикого типа. (B) Обработка хитозаном значительно снижала экспрессию ADA2, ALS2, PGA45 и ACE2 в клетках SC5314 дикого типа. Значения экспрессии сравнивали между группами штаммов дикого типа, обработанными хитозаном и без него. ^∗ P <0,05, ^∗∗∗ P <0.001 соответственно. Значения экспрессии были нормализованы к экспрессии гена ACT1 , как указано. Статистическую значимость определяли с использованием критерия Стьюдента t . Значения представляют собой средние значения ± стандартное отклонение не менее трех экспериментальных повторов.

Гены оттокной помпы, регулируемые Ada2, подавлялись хитозаном

В нескольких отчетах показано, что экспрессия генов переносчиков нескольких лекарственных средств CDR1, CDR2 и MDR1 может быть индуцирована противогрибковыми препаратами, и что эти гены связаны со многими клинически устойчивыми к лекарствам C.albicans (Goffeau et al., 1997; Kohli et al., 2001; Shukla et al., 2003; Pasrija et al., 2008). Прямая регуляция CDR1 и MDR1 с помощью Ada2 была доказана (Sellam et al., 2009). В соответствии с предыдущим отчетом (Sellam et al., 2009), делеция ADA2 вызвала значительное снижение экспрессии как MDR1 , так и CDR1 (рисунок 8A). Однако экспрессия MDR1 и CDR1 была значительно подавлена после обработки хитозаном (фигура 8B).Эти данные подтверждают вывод о том, что C. albicans ADA2 репрессируется хитозаном, что приводит к снижению экспрессии Ada2-регулируемых генов, регулирующих оттоковые насосы MDR1 и CDR1 .

Фигура 8. C. albicans Ada2-регулируемые гены оттокной помпы подавлялись хитозаном. (A) Экспрессия MDR1 и CDR1 положительно регулируется Ada2, поскольку делеция ADA2 значительно снижает экспрессию MDR1 и CDR1 .^∗∗ P <0,01 по сравнению со значением для необработанных клеток SC5314 дикого типа. (B) В ответ на хитозан экспрессия MDR1 и CDR1 была значительно подавлена. Значения экспрессии сравнивали между группами штаммов дикого типа, обработанными хитозаном и без него. ^∗∗ P <0,01 и ^∗∗∗ P <0,001 соответственно. Значения экспрессии были нормализованы к экспрессии гена ACT1 , как указано.Статистическую значимость определяли с использованием критерия Стьюдента t . Значения представляют собой средние значения ± стандартное отклонение не менее трех экспериментальных повторов.

Гистонацетилтрансфераза Gcn5 требовалась для толерантности к хитозану

Чтобы подтвердить, связано ли подавление ацетилирования гистонов с механизмом, лежащим в основе ингибирующего действия хитозана, были сконструированы мутанты и протестирована экспрессия GCN5 . При обработке хитозаном, калькофлюором уайт, каспофунгином и SDS штаммы с нулевой мутацией GCN5 демонстрировали фенотип, сопоставимый с фенотипами штаммов ada2 Δ (Фигуры 9A, B).У дополненных штаммов восстановилась устойчивость к хитозану. Более того, экспрессия GCN5 значительно ингибировалась хитозаном (фиг. 9C). Эти результаты показали, что хитозан подавляет активность ацетилирования гистонов, опосредованную комплексом SAGA, в C. albicans и, следовательно, подавляет рост грибов.

Рисунок 9. Ген гистонацетилтрансферазы GCN5 необходим для устойчивости к хитозану и агентам, разрушающим клеточную поверхность, а экспрессия GCN5 ингибируется хитозаном. (A) gcn5 Δ штаммы были высокочувствительны к хитозану. Кроме того, рост клеток gcn5 Δ значительно ингибировался агентами стресса клеточной стенки калькофлуор уайт и каспофунгином и (B) агентом SDS, нарушающим клеточные мембраны. Штамм SC5314 дикого типа и штамм с комплементами демонстрировали сходный рост. (C) Обработка хитозаном клеток SC5314 в течение 20 минут значительно подавляла экспрессию GCN5 . Значения представляют собой средние значения ± стандартное отклонение не менее трех экспериментальных повторов.^∗ P <0,05 по сравнению со значением для необработанных клеток SC5314 дикого типа. Значения экспрессии были нормализованы к экспрессии гена ACT1 , как указано. Статистическую значимость определяли с использованием критерия Стьюдента t .

Обсуждение

Антимикробная активность хитозана была документально подтверждена, но механизмы, лежащие в основе его противогрибкового действия на C. albicans , остаются неясными (Raafat et al., 2008; Kong et al., 2010; Pena et al., 2013; Cheung et al., 2015). Считается, что хитозан потенциально взаимодействует с поверхностью клетки, тем самым изменяя проницаемость клеток и блокируя транспортные системы (Rabea et al., 2003; Kong et al., 2010). Интересно, что в нескольких сообщениях предполагалось, что хитозан с низким молекулярным весом способен проникать через клеточную стенку и взаимодействовать с ДНК, тем самым подавляя транскрипцию (Hadwiger et al., 1986; Sudarshan et al., 1992). В этом исследовании мы идентифицировали 49 генов, участвующих в устойчивости к хитозану, с помощью системы скрининга мутантной библиотеки, и большинство из этих генов в настоящее время исследуются.В частности, участие этих генов в приверженности и ответах, связанных с противогрибковыми препаратами, является разумным (дополнительная таблица S4), учитывая, что хитозан может взаимодействовать с поверхностью клетки и что сам хитозан является стрессором, который может быть связан с некоторыми противогрибковыми ответами. Интересно, что несколько генов, необходимых для устойчивости к хитозану, обладают функциями, связанными с вирулентностью, включая филаментацию, развитие биопленок и вирулентность (дополнительная таблица S4). Результаты скрининга предполагают, что хитозан, использованный в этом исследовании, не только обладал способностями к физическому внеклеточному взаимодействию, но также имел потенциальное внутриклеточное действие.Примечательно, что некоторые грибковые патогены, такие как Cryptococcus neoformans , используют хитозан для поддержания целостности клеточной стенки во время вегетативной стадии (Baker et al., 2007). Остается открытым вопрос, может ли C. albicans неправильно распознать хитозан как хитин и включить его в клеточную стенку, что приведет к снижению роста клеток. Кроме того, crz1 Δ в SC5314 был сконструирован и протестирован на его чувствительность к хитозану. crz1 Δ штаммов необходимы для выживания в среде хитозана, но экспрессия CRZ1 показала незначительную разницу (неопубликованные данные).Путь кальциневрин-Crz1 участвует в устойчивости к стрессу и может активироваться несколькими внешними стимулами, особенно Ca ²⁺ (Rusnak and Mertz, 2000). Увеличение внутриклеточного кальция приводит к активации сигнального каскада (Cyert, 2003). Активированный кальциневрин затем дефосфорилирует Crz1p и способствует перемещению дефосфорилированной (активированной) формы Crz1 из цитозоля в ядро (Stathopoulos-Gerontides et al., 1999). Возможно, что действие хитозана на Crz1 в основном зависит от посттрансляционной делеции CRZ1 или CRZ1 , вызывающей общий эффект на стрессовую реакцию.Кроме того, необходимо дальнейшее изучение того, проявляют ли компоненты каскада кальциневрина, такие как CCh2, MID1, CNA1, CNB1 , чувствительные к хитозану фенотипы.

Комплекса Ada2-Ada3-Gcn5 SAGA в почкующихся дрожжах и C. albicans достаточно для устойчивой активности HAT, приводящей либо к индукции, либо к репрессии экспрессии определенных генов (Naar et al., 2001; Daniel and Grant, 2007). Действительно, C. albicans Ada2 нацелен на широкий спектр промоторов и играет глобальную роль в регуляции транскрипции (Sellam et al., 2009). Однако в данных скрининга библиотеки мутантов (дополнительная таблица S4) не было обнаружено никакого потенциального гена-кандидата на связывание Ada2, необходимого для устойчивости к хитозану. Более того, три специфических фактора транскрипции, а именно Gal4, Cap1 и Mrr1, могут быть задействованы Ada2, чтобы влиять на гликолиз, реакцию на окислительный стресс и устойчивость к лекарствам, соответственно (Sellam et al., 2009). Несмотря на обнаружение легкого, незначительного дефекта роста как у штаммов gal4 Δ, так и cap1 Δ в ответ на стимуляцию хитозаном (дополнительная таблица S4), мы не можем исключить возможность того, что хитозан может играть роль в контроле клеточного метаболизма и потенциально может вызвать реакцию окислительного стресса во время лечения.Кроме того, наши результаты предполагают, что гены, связанные с лекарственной устойчивостью CDR1 и MDR1 , могут не иметь роли в устойчивости к хитозану, учитывая, что Mrr1 контролирует экспрессию MDR1 и что устойчивость к лекарственным средствам наблюдается у C. albicans и . Штаммы mrr1 Δ в данных скрининга не подавляли ответ на хитозан (дополнительная таблица S4) (Morschhauser et al., 2007). Под воздействием стрессоров комплекс Ada2-Ada3-Gcn5 SAGA координируется с другими клеточными факторами, которые модулируют модификацию гистонов и регуляцию генов (Bruno et al., 2006; Селлэм и др., 2009; Ramirez-Zavala et al., 2014), чтобы адаптироваться к различным стимулам и нишам хозяина (Bruno et al., 2006; Sellam et al., 2009; Ramirez-Zavala et al., 2014). Мы обнаружили, что потеря ADA2 в C. albicans привела к уменьшению толщины клеточной стенки примерно на 50%, что может объяснить, почему штаммы ada2 Δ не могут выжить во многих неблагоприятных условиях и проявляют слабую вирулентность (Sellam et al. др., 2009). Bruno et al. (2006) предположили, что фактор транскрипции Cas5, который обеспечивает целостность C.albicans клеточная стенка в ответ на каспофунгин может быть рекрутирована белком Ada2. Мы предполагаем, что совместная активация Ada2-Cas5 также может играть важную роль в адаптации хитозана у C. albicans .

Мы предположили, что ингибирование экспрессии комплекса SAGA хитозаном является одним из биоцидных механизмов хитозана против C. albicans . Эта гипотеза была дополнительно подтверждена открытием, что ADA2, и Ada2-регулируемые гены клеточной стенки ингибируются хитозаном.Кроме того, GCN5 HAT репрессируется в ответ на хитозан, а мутантные штаммы GCN5 также очень чувствительны к хитозану, разрушающим клеточную стенку (калькофтор белый и каспофунгин) и разрушающим клеточные мембраны агентам (SDS). Данные предполагают, что обработка хитозаном клеток C. albicans снижает уровни хитина и β-глюкана или изменяет ультраструктуру клеточной стенки и клеточной мембраны за счет ингибирования экспрессии компонентов комплекса SAGA. Таким образом, анализ состава клеточной стенки и организации клеток WT, обработанных хитозаном, и клеток ada2 Δ может предоставить прямые доказательства, подтверждающие наше предположение.Однако главная проблема при проведении эксперимента заключается в том, что обработанные хитозаном клетки C. albicans были резко агрегированы, поскольку положительно заряженный хитозан может взаимодействовать с отрицательно заряженной поверхностью микробных клеток. Мы все еще ищем способ решить эту проблему. Кроме того, также возможно, что результат является результатом суммы косвенных эффектов, в которых для ответа хитозана требуется ряд сигнальных путей, что приводит к снижению целостности клеточной стенки и изменению экспрессии генов, или следы хитина, присутствующие в образце, могут также способствуют влиянию.Наконец, механизм действия хитозана сильно зависит от типа микроорганизма, его молекулярной массы и характеристик (Verlee et al., 2016).

Клеточная стенка грибов, которая является интерфейсом между клетками и окружающей средой, обеспечивает механическую прочность и служит физическим барьером для защиты грибковых клеток от неблагоприятных условий окружающей среды (Durán and Nombela, 2004). Компактная сеть клеточной стенки грибов не только важна для морфологии и жизнеспособности клеток, но также, благодаря активности нескольких белков адгезина, опосредует как межклеточную адгезию, так и адгезию между клетками и поверхностями материала окружающей среды, что является начальным и важным этапом в развитие биопленки (Finkel and Mitchell, 2011; Desai and Mitchell, 2015).Кроме того, компоненты клеточной стенки грибов важны для патогенеза и иммунного ответа на C. albicans (Hoyer et al., 1999; Chaffin, 2008; Plaine et al., 2008; Lenardon et al., 2010; Холл и Гоу, 2013). Таким образом, клеточная стенка и мембрана грибов являются отличными мишенями для противогрибковых соединений, и было разработано несколько клинических противогрибковых препаратов, нацеленных на клеточную стенку или клеточную мембрану (Robbins et al., 2016). Однако ограниченное количество современных терапевтических возможностей для грибковых инфекций и потенциальных побочных реакций на лекарства остаются проблемами.Кроме того, человеческие грибковые патогены более тесно связаны с хозяином, чем человеческие бактериальные патогены, поэтому разработка новых противогрибковых средств требует больше времени, чем разработка антибактериальных препаратов. Эти факторы предполагают, что хитозан является новой и очень многообещающей молекулой для лечения грибковых инфекций человека, если он используется в сочетании с противогрибковыми препаратами или является многообещающим средством клинической терапии, особенно при инфекциях кожи и слизистых оболочек. Действительно, противогрибковая активность, опосредованная хитозаном, усиливается после лечения фотодинамической инактивацией (PDI) (Lin et al., 2018). Глобальный транскриптомный подход к изучению того, как C. albicans реагирует на хитозан, изучается в лаборатории, и мы считаем, что эта генетическая информация предоставит больше информации для нашей разработки методов лечения, направленных на более конкретную борьбу с грибковыми инфекциями в будущем.

Авторские взносы

Y-TL и C-HL разработали это исследование и разработали эксперименты. P-YS, Y-TL, Y-KT и C-HL подготовили рукопись. C-HL отредактировал рукопись.Y-TL и F-SD выполнили скрининговый тест мутантной библиотеки. P-YS и Y-KT создали нокаутные штаммы и провели тесты на чувствительность и количественную ПЦР. P-YS и Y-TL выполнили ТЕМ. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

Финансирование

Это исследование было поддержано NTU-106R7813, NTU-107L7813 и NTU-108L7813 из Национального университета Тайваня и MOST-105-2628-B-002-018-MY3 из Министерства науки и технологий.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Мы благодарны сотрудникам Technology Commons, College of Life Science, NTU за помощь в TEM. Мы благодарим профессора Яу-Би Кера за помощь в исследовании и анализе хитозана (Департамент пищевых наук, Университет Хункуанг).

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2019.00602/full#supplementary-material

Сноски

http: // www.fgsc.net/candida/FGSCcandidaresources.htm

Список литературы

Альбуркенке, К., Букари, С. А., Нейра-Каррильо, А., Урзуа, Б., Эрмосилла, Г., и Тапиа, К. В. (2010). Противогрибковая активность низкомолекулярного хитозана в отношении клинических изолятов Candida spp. Med. Mycol. 48, 1018–1023. DOI: 10.3109 / 13693786.2010.486412